| 幽门螺杆菌UreB单克隆抗体的制备及尿素酶活性抑制能力的研究 |
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| 引用本文： | 吴亚男,邹全明,罗萍,郭刚,王晓勤.幽门螺杆菌UreB单克隆抗体的制备及尿素酶活性抑制能力的研究[J].免疫学杂志,2005,21(5):393-396. |
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| 作者姓名： | 吴亚男 邹全明 罗萍 郭刚 王晓勤 |
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| 作者单位： | 第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家“九五”重点科技攻关项目（96-901-01-54）及全军“九五”医药卫生科研基金项目（98D044）资助 |
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| 摘 要： | 目的制备抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体,并检测其对尿素酶活性的抑制能力。方法以重组UreB蛋白为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗UreB单克隆抗体,用ELISA检测mAb的效价、亲和常数;用Westernblot检测mAb的特异性。将尿素酶与单克隆抗体预孵育后加入含有尿素和酚红的缓冲液,于550nm测定单克隆抗体对尿素酶活性的抑制能力。结果得到5株稳定分泌抗UreB的单克隆抗体的杂交瘤细胞1D5、9E1、3A2、1D6、6E6。测定抗体亚型1D5,9E1,3A2为IgG1,1D6、6E6为IgG2a,亲和常数分别为4×108、4.6×108、2.8×108、2×109、3×109L/mol。Westernblot鉴定5种单克隆抗体均能和重组UreB及全菌蛋白中的UreB抗原发生特异性结合,且均不与肠道常见菌发生交叉反应。5株单克隆抗体中只有6E6具有对尿素酶活性的抑制作用,且抑制率与单克隆抗体剂量相关。结论制备了5株稳定分泌抗UreB抗体的杂交瘤细胞株,产生的单克隆抗体效价高且特异性好,其中6E6能抑制尿素酶活性。本研究为探讨尿素酶的作用机制、UreB的纯化及Hp的临床诊断和治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 尿素酶B亚单位 单克隆抗体 尿素酶活性 |
| 文章编号： | 1000-8861（2005）05-0393-04 |
| 收稿时间： | 2005-05-09 |
| 修稿时间： | 2005-06-06 |
Preparation of anti-Helicobacter pylori UreB monoclonal antibody and the detection of the ability of inhibition the urease activity |
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| WU Ya-nan,ZOU Quan-ming,LUO Ping,GUO Gang,WANG Xiao-qin.Preparation of anti-Helicobacter pylori UreB monoclonal antibody and the detection of the ability of inhibition the urease activity[J].Immunological Journal,2005,21(5):393-396. |
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| Authors: | WU Ya-nan ZOU Quan-ming LUO Ping GUO Gang WANG Xiao-qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | UreB Monoclonal antibody Activity of urease |
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