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抗坏血酸诱导新生鼠神经干细胞向多巴胺能神经元的分化
引用本文:沈岳飞,陈梅玲,罗彦妮,范瑞芳,莫雪安. 抗坏血酸诱导新生鼠神经干细胞向多巴胺能神经元的分化[J]. 中国神经再生研究, 2009, 13(23): 4411-4416
作者姓名:沈岳飞  陈梅玲  罗彦妮  范瑞芳  莫雪安
作者单位:广西医科大学第一附属医院神经内科,桂林医学院附属医院神经内科,广西医科大学第一附属医院神经内科,广西医科大学第一附属医院神经内科,广西医科大学第一附属医院神经内科
基金项目:广西回国基金资助(桂科回0448017) 广西自然科学基金资助(桂科自0832140)
摘    要:
背景:针对帕金森病进行细胞移植治疗的研究进程中,除寻求合适的细胞系外,如何将各种有分化潜能的细胞诱导为含量丰富、有功能的多巴胺能神经元尤为关键。目的:观察不同浓度抗坏血酸对神经干细胞向多巴胺能神经元分化的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-01/12在广西医科大学科学实验中心完成。材料:清洁级新生24 h内SD大鼠30只,由广西医科大学实验动物中心提供。抗坏血酸为Sigma产品。方法:取新生鼠脑组织,组织块胰蛋白酶消化法体外分离培养神经干细胞,传至第2代以5×108 L-1密度接种。设立4组:空白对照组不给予抗坏血酸,仅加入含体积分数为10%的胎牛血清、2% B27的DMEM/F12培养基;剩余3组在此基础上分别加入50,100,200 μmol/L抗坏血酸进行诱导,10 d后终止诱导。主要观察指标:RT-PCR检测诱导后细胞酪氨酸羟化酶基因mRNA的表达,免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞,检测神经干细胞向多巴胺能神经元分化率。结果:各浓度抗坏血酸诱导组均得到795 bp的扩增片断,即均表达酪氨酸羟化酶 mRNA。神经球具有自我更新和表达巢蛋白的能力,诱导分化后的细胞能表达神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性抗原。与空白对照组比较,50,100,200μmol/L抗坏血酸诱导组酪氨酸羟化酶阳性细胞率均明显升高(P < 0.05);且100,200 μmol/L抗坏血酸诱导组升高幅度明显高于50 μmol/L (P < 0.05),100,200 μmol/L抗坏血酸诱导组间比较无明显差异(P > 0.05)。结论:从新生鼠脑组织分离出的神经干细胞在体外具有自我更新、多向分化潜能及表达巢蛋白的能力。50~200 μmol/L抗坏血酸均能促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化,抗坏血酸浓度从100 μmol/L增加至200 μmol/L时酪氨酸羟化酶阳性细胞率无明显变化。

关 键 词:神经干细胞;分化;多巴胺能神经元;抗坏血酸

Differentiation into dopaminergic neurons from neonatal rat neural stem cells induced by ascorbic acid
Affiliation:Department of Neurology, First Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China,,Department of Neurology, First Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China,Department of Neurology, First Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China,Department of Neurology, First Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China
Abstract:
Keywords:
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