| 大鼠Smac基因的克隆及其在心肌细胞H9C2中的表达 |
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| 引用本文： | 郭彩霞,李艳博,王华,冯星,黄渭,孙志伟.大鼠Smac基因的克隆及其在心肌细胞H9C2中的表达[J].吉林大学学报(医学版),2008,34(3):369-373. |
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| 作者姓名： | 郭彩霞 李艳博 王华 冯星 黄渭 孙志伟 |
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| 作者单位： | 吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,吉林长春,130021;吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室,吉林长春,130021 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研项目 |
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| 摘 要： | 目的：克隆大鼠促凋亡基因Smac，构建真核表达载体pcDNA3.1+-rSmac，并在心肌细胞中表达。方法：应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从大鼠肾组织中扩增到大鼠Smac基因的CDs片段，构建含Smac基因的真核表达载体pcDNA3.1+-rSmac并将此重组质粒、空载体pcDNA3.1+、pcDNA3.1+-EGFP通过脂质体介导转染大鼠心肌细胞H9C2，荧光显微镜、流式细胞术间接检测转染效率，RT-PCR法检测外源基因的表达。结果：经测序目的基因序列与GenBank（NM_001008292）公布的结果一致，所构建的重组质粒pcDNA3.1+-rSmac经PCR和酶切鉴定所释放的片段大小与预期结果相符。荧光显微镜和流式细胞术检测，细胞转染有效，转染效率达38.36%。转染重组载体pcDNA3.1+-rSmac 48 h后，H9C2细胞Smac的mRNA水平明显升高。其中，对照组Smac/β-actin为1.19，空载体组Smac/β-actin为1.31，二者之间差异无显著性（P>0.05）；转染pcDNA3.1+-rSmac组Smac/β-actin为1.67，与对照组比较差异具有显著性（P<0.01）。结论：克隆大鼠Smac基因成功，成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1+-rSmac，并在转染后的心肌细胞中表达，为研究Smac基因在心肌细胞凋亡过程中的调控作用奠定基础。
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| 关 键 词： | Smac 基因转染 真核表达 |
| 收稿时间： | 2007-08-04 |
Cloning of rat Smac gene and its expression in cardiocyte H9C2 |
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| GUO Cai-xia,LI Yan-bo,WANG Hua,FENG Xing,HUANG Wei,SUN Zhi-wei.Cloning of rat Smac gene and its expression in cardiocyte H9C2[J].Journal of Jilin University: Med Ed,2008,34(3):369-373. |
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| Authors: | GUO Cai-xia LI Yan-bo WANG Hua FENG Xing HUANG Wei SUN Zhi-wei |
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| Institution: | 1.Department of Health Toxicology, School of Public Health, Jilin University, Changchun 130021, China；2.MH Radiobiology Research Unit, School of Public Health, Jilin University, Changchun 130021, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Smac gene transfection eukaryotic expression |
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