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抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定
引用本文:肖代雯,朱慧芬,沈昕,邢薇,黄宇,雷萍,黄韬,王国斌,沈关心. 抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定[J]. 中国免疫学杂志, 2008, 24(1): 59-61
作者姓名:肖代雯  朱慧芬  沈昕  邢薇  黄宇  雷萍  黄韬  王国斌  沈关心
作者单位:1. 四川省人民医院检验科,成都,610072
2. 华中科技大学同济医学院,武汉,430030
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 教育部博士点专项资金 , 湖北省科技攻关项目
摘    要:目的:抗转铁蛋白受体(TfR)双价抗体(bsFv)构建、表达及其与细胞结合的活性鉴定。方法:以抗TfR的单链抗体(scFv)为模板,设计引物引入中问连接肽(G4S)及酶切位点AscI,通过PCR方法扩增两条scFv片段,将其连接并克隆至原核表达载体pAB1,转化大肠杆菌TG1,阳性菌经IPTG诱导表达,FCM检测bsFv与K562,HepG2肿瘤细胞结合的活性及特异性。结果:酶切鉴定及DNA测序证明该bsFv构建成功;SDS-PAGE、Westernblot鉴定表明表达蛋白分子量与bsFv理论值一致;FCM结果证明bsFv可与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合,且结合的阳性率较scFv有所提高。结论:成功构建了抗转TfR的bsFv,且能与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合。

关 键 词:转铁蛋白受体  单链抗体  双价抗体  抗转铁蛋白受体  双价  抗体  诱导表达  Construction  transferrin receptor  fragment  variable  chain  single  characterization  阳性率  特异性结合  肿瘤细胞  理论值  蛋白分子量  Western  blot  测序  酶切鉴定
文章编号:1000-484X(2008)01-0059-03
收稿时间:2007-01-29
修稿时间:2007-01-29

Construction,expression and characterization of a bivalent single chain variable fragment against transferrin receptor
XIAO Dai-Wen,ZHU Hui-Fen,SHEN Xin,XING Wei,HUANG Yu,LEI Ping,HUANG Tao,WANG Guo-Bin,SHEN Guan-Xin. Construction,expression and characterization of a bivalent single chain variable fragment against transferrin receptor[J]. Chinese Journal of Immunology, 2008, 24(1): 59-61
Authors:XIAO Dai-Wen  ZHU Hui-Fen  SHEN Xin  XING Wei  HUANG Yu  LEI Ping  HUANG Tao  WANG Guo-Bin  SHEN Guan-Xin
Abstract:
Keywords:Transferrin receptor  Single chain variable fragment  Bivalent scFv
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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