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抑癌基因kruppel样因子6及其剪接体蛋白对HepG2细胞增殖和分化的影响
引用本文:潘修成,陈智,季芳,郭忠胜,陈明,傅涓涓. 抑癌基因kruppel样因子6及其剪接体蛋白对HepG2细胞增殖和分化的影响[J]. 中华肝脏病杂志, 2008, 16(9): 683-687
作者姓名:潘修成  陈智  季芳  郭忠胜  陈明  傅涓涓
作者单位:1. 徐州医学院附属医院感染性疾病科,221002
2. 浙江大学附属第一医院传染病研究所
基金项目:徐州医学院附属医院博士启动基金 
摘    要:
目的 研究抑癌基因Kruppel样因子(KLF)6及其剪接体蛋白对肝癌细胞株HepG2细胞增殖和分化的影响. 方法 RT-PCR扩增肝细胞癌组织中KLF6剪接体cDNA并测定其序列;构建KLF6剪接体真核表达质粒pcDNA3.1A(-)/KLF6V.转染HepG2细胞后,经G418筛选获得稳定表达KLF6全长和其剪接体蛋白的HepG2细胞,分别命名为HepG2/KLF6和HepG2/KLF6V.四甲基偶氮唑盐法测定该两种HepG2细胞的增殖活性;同时分别以放射免疫法或Western blot技术测定白蛋白、甲胎蛋白或P21WAF1,细胞周期素D1蛋白在HepG2/KLF6或HepG2/KLF6V细胞中的表达情况.结果从肝细胞癌组织中扩增出一种KLF6剪接体,序列分析提示该剪接体缺失127 nt,引起KLF6蛋白近羧基端缺失42个氨基酸;KLF6V mRNA在肝癌及癌旁组织均有表达,但癌组织表达水平明显增高.HepG2/KLF6细胞生长速度较慢而HepG2/KLF6V细胞增殖较快,同时HepG2/KLF6细胞P21WAF1蛋白表达及白蛋白分泌水平明显高于HepG2/KLF6V细胞,而细胞周期素D1表达及甲胎蛋白分泌水平在HepG2/KLF6V细胞高于HepG2/KLF6细胞.结论 肝细胞癌组织中存在KLF6剪接体,该剪接体能对抗全长KLF6基因抑制细胞生长、促进细胞分化等的功能.

关 键 词:癌,肝细胞  剪接体  基因,抑制  细胞分化  Kruppel样因子6

Effect of KLF6 and its splice variant KLF6V on proliferation and differentiation of human hepatocellular carcinoma HepG2 cells
PAN Xiu-cheng,CHEN Zhi,JI Fang,GUO Zhong-sheng,CHEN Ming,FU Juan-juan. Effect of KLF6 and its splice variant KLF6V on proliferation and differentiation of human hepatocellular carcinoma HepG2 cells[J]. Chinese journal of hepatology, 2008, 16(9): 683-687
Authors:PAN Xiu-cheng  CHEN Zhi  JI Fang  GUO Zhong-sheng  CHEN Ming  FU Juan-juan
Affiliation:Department of Infectious Diseases, Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, China. xzpxc68@126.com
Abstract:
Keywords:Carcinoma,hepatocellular,Spliceosomes  Genes,suppressor,Cell differentiation  Kruppel-like factor 6
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