| MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 马红梅,谢显功,刘海燕,刘彦明,肖洪广,李宁,范婷婷,郑君德. MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 热带医学杂志, 2010, 10(12) |
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| 作者姓名： | 马红梅 谢显功 刘海燕 刘彦明 肖洪广 李宁 范婷婷 郑君德 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金博士科研启动项日，广东省中医药局建设中医药强省科研课题，广州医学院博士启动基金，广东省高等学校重点扶持学科资助项目 |
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| 摘 要： | ![]()
目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%。结论本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量。
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| 关 键 词： | MTH1 RT-PCR MDCK |
Establishment of A Semi-quantitative RT-PCR System for Detection of MTH1 Expression |
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| MA Hong-mei,XIE Xian-gong,LIU Hai-yan,LIU Yan-ming,XIAO Hong-guang,LI Ning,FANG Ting-ting,ZHENG Jun-de. Establishment of A Semi-quantitative RT-PCR System for Detection of MTH1 Expression[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2010, 10(12) |
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| Authors: | MA Hong-mei XIE Xian-gong LIU Hai-yan LIU Yan-ming XIAO Hong-guang LI Ning FANG Ting-ting ZHENG Jun-de |
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| Abstract: | ![]()
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