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刚地弓形虫RH株主要表面抗原1的原核表达和纯化及免疫反应性检测
引用本文:司进,汤俊明,赵松,殷旭仁,徐明,何伟,华万全,梁幼生,朱荫昌. 刚地弓形虫RH株主要表面抗原1的原核表达和纯化及免疫反应性检测[J]. 中华检验医学杂志, 2004, 27(2): 107-109
作者姓名:司进  汤俊明  赵松  殷旭仁  徐明  何伟  华万全  梁幼生  朱荫昌
作者单位:1. 214064,无锡,江苏省寄生虫病防治研究所
2. 宜兴市第一人民医院
基金项目:江苏省寄生虫病重点学科江苏省寄生虫分子生物学实验室开放课题资助项目 (WK2 0 0 2 15 )
摘    要:
目的 对重组的刚地弓形虫RH株主要表面抗原 1(SAG1)原核表达载体SAG1/pET 32c ,在大肠杆菌中诱导表达产物进行亲和纯化 β免疫反应性检测评价。 方法 接种含SAG1/pET 32c的BL2 1单菌落至LB肉汤中 ,1∶10 0稀释转种后用 1mmol/L终浓度的IPTG诱导表达 ,表达产物用Ni2 螯合柱亲和纯化 ,并用免疫印迹技术对纯化的融合蛋白进行免疫反应性检测 ,用重组融合蛋白对弓形虫病 5 2份阳性和 4 0份阴性血清进行初步检测。结果 SAG1/pET 32c在原核系统中 ,经诱导表达出约 370 0 0大小的融合蛋白 ,并以包涵体的形式存在 ;通过Ni2 亲和柱纯化可获得SAG1重组融合蛋白。免疫印迹试验表明 ,重组SAG1融合蛋白能被弓形虫阳性血清特异性的识别。初步检测表明 ,阳性和阴性符合率分别为 81% (42 /5 2 )和 95 % (38/40 )。结论 SAG1在原核系统获得高效表达 ,亲和纯化的rSAG1具有较强的免疫反应性 ,对弓形虫病的免疫诊断具有潜在应用价值 ,也为人用或兽用的弓形虫病免疫诊断试剂盒研制奠定了基础。

关 键 词:弓形虫病  抗原  免疫诊断
修稿时间:2003-05-23

The evaluation expression purification and immunoresponse of the major surface antigen SAG1 of Toxoplasma gonddi RH strain
SI Jin,TANG Jun-ming,ZHAO Song,YIN Xu-ren,XU Ming,HE Wei,HUA Wan-quan,LIANG You-sheng,ZHU Yin-chang. Jiangsu Institute of Parasitic Diseases,Wuxi ,China. The evaluation expression purification and immunoresponse of the major surface antigen SAG1 of Toxoplasma gonddi RH strain[J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2004, 27(2): 107-109
Authors:SI Jin  TANG Jun-ming  ZHAO Song  YIN Xu-ren  XU Ming  HE Wei  HUA Wan-quan  LIANG You-sheng  ZHU Yin-chang. Jiangsu Institute of Parasitic Diseases  Wuxi   China
Affiliation:SI Jin*,TANG Jun-ming,ZHAO Song,YIN Xu-ren,XU Ming,HE Wei,HUA Wan-quan,LIANG You-sheng,ZHU Yin-chang. *Jiangsu Institute of Parasitic Diseases,Wuxi 214064,China
Abstract:
Keywords:Toxoplasmosis  Antigen  Immunodiagnosis
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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