| 酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的功能伙伴 |
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| 引用本文： | 霍丽蓉,邹俊华,钟南.酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的功能伙伴[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(20). |
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| 作者姓名： | 霍丽蓉 邹俊华 钟南 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学基础医学院生理学系,北京市,100069;山西医科大学基础医学院微生物与免疫教研室,山西省太原市,030001
2. 北京大学医学部基础医学院遗传系,北京市,100083 |
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| 基金项目： | 山西医科大学青年基金项目 |
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| 摘 要： | 背景:酵母双杂交系统3是目前最常用的筛选相互作用蛋白质的技术平台.目的:运用酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的相互作用子.方法:构建酵母细胞表达载体hnRNP E1-pGBKT7/c-myc,转化酵母菌AH109,Western blot证实蛋白表达,进行毒性和自激活检验,与转化了cDNA文库的酵母菌Y187接合,经过营养删除、滤膜反应以及回交试验筛选酵母文库中与hnRNP E1相互作用的蛋白.结果与结论:hnRNP E1蛋白能在酵母中正常表达,对酵母细胞无毒性,不存在自激活现象.经缺陷培养基3次传代及滤膜反应初步筛选出了16个候选基因,再经NCBI基因比对(BLASTN和BLASTP)及酵母细胞中的免疫沉淀反应最终获得了8个候选蛋白.提示hnRNP E1可能参与特定细胞内的复制,转录,mRNA运输、细胞周期、细胞自噬及免疫应答的过程,并且可能参与某些遗传病的发病过程.
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| 关 键 词： | 核不均一核糖核蛋白 酵母双杂交 蛋白质 相互作用子 质粒 |
Screening of interactional partners of human heterogeneous ribonucleo protein E1 using yeast two-hybrid system 3 |
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| Huo Li-rong,Zou Jun-hua,Zhong Nan.Screening of interactional partners of human heterogeneous ribonucleo protein E1 using yeast two-hybrid system 3[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(20). |
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| Authors: | Huo Li-rong Zou Jun-hua Zhong Nan |
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