TGF-β通路调控椎间盘组织中胸腺基质淋巴细胞生成素表达的机制研究

 目的 探讨椎间盘组织中转化生长因子-β（transforming growth factor-β, TGF-β）通路调节胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）表达的相关分子机制。方法 在体外培养小鼠椎间盘组织，用肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factora, TNF-α）模拟椎间盘突出时的炎症微环境，利用TGF-β通路的抑制剂或核因子-κB（nuclear factor-kappa B, NF-κB）抑制剂培养后，用ELISA法、免疫组化法及Western法测定椎间盘组织中TSLP的变化。结果 （1）TNF-α组的磷酸化NF-κB的阳性细胞率为92.4%±1.4%，对照组为9.4%±3.3%。加入TGF-βⅠ型受体抑制剂的HTS组磷酸化NF-κB的阳性细胞率为74.1%±6.7%；Western blot结果显示：HTS组和TNF-α组分别与对照组比较，表达磷酸化NF-κB明显增高，差异有统计学意义。（2）ELISA结果显示：HTS组表达TSLP为（482.8±44.5） pg/ml，对照组为（66.8±4.2） pg/ml，加入IMD和MG后，其表达TSLP下调。（3）TGF-β通路主要因子Smad 2/3的免疫组化结果显示：对照组中磷酸化Smad 2/3的阳性细胞率为46.6%±3.3%，HTS组为23.7%±10.9%，两者比较差异有统计学意义；Western blot结果显示： HTS组与对照组相比，表达磷酸化Smad 2/3明显下调。（4）ELISA结果显示：HTS组上调了TSLP的表达，MCP-1、IL-6均表达下调，MMP-3的表达无变化。结论 在生理条件下，椎间盘组织中内源性TGF-β通过抑制NF-κB的活性限制了TSLP的表达；当椎间盘突出时，内源性的稳态系统被打破，TGF-β活性下降或缺失，抑制NF-κB的能力下降，而后者促使TSLP生成增加，促进椎间盘突出重吸收。