MTX和IFN-α-2b诱导K562细胞凋亡及p73基因表达的研究

目的 :研究甲氨蝶呤 (MTX)和干扰素 α 2b(IFN α 2b)诱导人慢性粒细胞白血病急变细胞株 (K5 62 )凋亡的作用及凋亡相关基因p73mRNA在凋亡前后表达的变化。方法 :采用形态学观察法、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测K5 62细胞凋亡 ,采用半定量逆转录PCR方法 (RT PCR)检测p73mRNA的表达。结果 :4μg/mLMTX和60 0IU/mLIFN α 2b分别作用于K5 62细胞 6、12和 2 4h ,通过Wright’s Giemsa染色可见部分细胞染色质明显固缩。DNA琼脂糖凝胶电泳可见清晰的梯形条带。流式细胞仪检测 ,MTX作用细胞6、12和 2 4h ,细胞凋亡率 (AR)分别为 5 15 %、14 70 %和 3 5 49% ;而IFN α 2b作用 6、12和 2 4h ,AR分别为 2 3 3 %、11 90 %和 3 5 15 %。对照组AR分别为 0 93 %和 1 0 9%。半定量RT PCR测定表明 ,IFN α 2b作用 2 4h组p73mRNA表达较对照组下调 ( 0 43± 0 0 5vs 0 66± 0 11,P <0 0 5 ) ,其余各组无明显变化。结论 :MTX、IFN α 2b可诱导K5 62细胞凋亡 ;在MTX、IFN α 2b诱导K5 62细胞凋亡的早期 ,p73mRNA表达无明显变化 ;IFN α 2b作用 2 4h ,p73mRNA表达下调。

Study on apoptosis of K562 cell line and expression of p73 gene induced by MTX and IFN-α-2b