| 内质网应激在酸诱导的人椎间盘髓核细胞损伤中的作用机制研究 |
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| 引用本文： | 谢志阳,陈 露,张 聪,王 锋,刘 磊,洪 鑫,吴小涛. 内质网应激在酸诱导的人椎间盘髓核细胞损伤中的作用机制研究[J]. 中国脊柱脊髓杂志, 2018, 0(8): 732-740 |
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| 作者姓名： | 谢志阳 陈 露 张 聪 王 锋 刘 磊 洪 鑫 吴小涛 |
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| 作者单位： | 东南大学附属中大医院脊柱外科中心东南大学医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（编号81572170, 81572190），江苏省普通高校研究生科研创新计划项目（编号KYLX16_0302） |
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| 摘 要： | ![]()
目的 :模拟人椎间盘髓核(nucleus pulposus,NP)酸性环境,研究酸诱导的内质网应激活化以及内质网应激在酸诱导的髓核细胞损伤中的作用机制。方法:体外单层培养人正常髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)系,以p H值7.4为对照,p H值7.0和6.5分别模拟正常和退变椎间盘酸性环境,培养12~72h,建立酸诱导的髓核细胞损伤模型。采用CCK8法检测髓核细胞增殖情况,透射电镜检测髓核细胞中内质网应激活化情况,免疫荧光检测内质网应激特异性标志物糖调节蛋白78(78 k Da glucose-regulated protein,GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达。应用4-PBA(内质网应激阻断剂)阻断内质网应激后,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;β半乳糖苷酶染色检测细胞老化。Western blot检测LC3、GATA4、p53、p21、p16、Bax、Bcl-2和Caspase3蛋白变化情况。结果 :与对照组相比,酸刺激下(p H6.5组)髓核细胞整体增殖力较对照组明显下降;透射电镜下可见内质网扩张明显,膜表面积增加,内质网线粒体膜结构形成,伴线粒体肿胀;细胞免疫荧光检测提示GRP78和CHOP表达明显增加(P0.05)。应用4-PBA后,细胞凋亡率增加,且能够显著增加酸诱导的G1期停滞及β半乳糖苷酶阳性染色率(P0.05)。Western blot检测发现,酸刺激下,髓核细胞LC3、GATA4、p53、p21、p16、Bax和Caspase3表达增高(P0.05),Bcl-2表达降低(P0.05);应用4-PBA后可降低LC3比值和Bcl-2表达水平,并显著升高GATA4、p53、p21、p16、Bax和Caspase3(P0.05)。结论:酸性微环境能够活化内质网应激,在酸诱导的人髓核细胞急性损伤中起保护作用。
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| 关 键 词： | 椎间盘退变；髓核细胞；内质网应激；酸 |
| 收稿时间： | 2018-03-25 |
| 修稿时间： | 2018-06-08 |
A study of the effect of the endoplasmic reticulum stress in protection the human nucleus pulposus cells from the acid-induced injury |
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| XIE Zhiyang,CHEN Lu,ZHANG Cong. A study of the effect of the endoplasmic reticulum stress in protection the human nucleus pulposus cells from the acid-induced injury[J]. Chinese Journal of Spine and Spinal Cord, 2018, 0(8): 732-740 |
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| Authors: | XIE Zhiyang CHEN Lu ZHANG Cong |
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| Affiliation: | Department of Spine Surgery, Zhongda Hospital, School of Medicine, Southeast University, Nanjing, Jiangsu Province, 210009, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Intervertebral disc degeneration Nucleus pulposus Endoplasmic reticulum stress Acid |
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