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hper1基因3′端UTR区双荧光素酶报告系统构建
引用本文:赵溪岩,成姝婷,勾洵,王正荣,肖静,郭慧玲,汪宇辉.hper1基因3′端UTR区双荧光素酶报告系统构建[J].四川生理科学杂志,2013,35(1):4-6.
作者姓名:赵溪岩  成姝婷  勾洵  王正荣  肖静  郭慧玲  汪宇辉
作者单位:赵溪岩 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041;四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041;四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041); 成姝婷 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041);勾洵 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041;四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041;四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041); 王正荣 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041); 肖静 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041); 郭慧玲 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041); 汪宇辉 (四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室卫生部时间生物学重点实验室,四川 成都610041四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都610041四川大学“985工程——创新药物研究科技创新平台”,四川 成都610041);
基金项目:国家自然科学基金(编号:41074131)
摘    要:目的:构建hper1基因3′端UTR区双荧光素酶报告系统pmiR-RB-REPORT^TM-hper1-3′UTR(PMIR-3′UTR),检测其表达,为研究hperl基因的表达调控及microRNA调控靶基因的结合位点提供基础平台。方法:用PCR扩增的方法提取hper1基因3′UTR序列,并连接至pmiR—IBREPORT^TM(PMIR)双荧光素酶报告载体的多克隆位点,测序验证插入序列并转染入A549细胞检测其荧光素酶活性。结果:测序结果表明PMIR-3′UTR的插入序列正确,在转染入A549细胞后其荧光素酶能正常表达。结论:PMIR-3′UTR双荧光素酶报告系统构建成功。

关 键 词:hper1基因  31UTR区域  PMIR-3′UTR

Construction of dual-luciferase reporter assaysystem of hper1 gene 3′UTR
Zhao Xi-yan,Cheng Shu-ting,Gou Xun,Wang Zheng-rong,Xiao Jing,Guo Hui-ling,Wang Yu-hui.Construction of dual-luciferase reporter assaysystem of hper1 gene 3′UTR[J].Sichuan Journal of Physiological Sciences,2013,35(1):4-6.
Authors:Zhao Xi-yan  Cheng Shu-ting  Gou Xun  Wang Zheng-rong  Xiao Jing  Guo Hui-ling  Wang Yu-hui
Institution:1,2,3(1.Ministry of Health Key Laboratory of Chronobiology,College of Basic Medicine and Forensic Medicine,Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041;2.State Key Laboratory of Biotherapy,Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041;3.Sichuan University "985 Project——Science and Technology Innovation Platform for Novel DrugDevelopment",Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041)
Abstract:Objective: To construct pmiR-RB-REPORT^TM- hper1-3′UTR(PMIR-3′UTR)of hperl and observe the expression of it in human lung cancer cell line A549. To provide effective information of following expression regulation of hperl and regulation of target genes binding sites by rnieroRNA. Methods: Amplification of the fragment containing 3′ UTR of hperl gene by PCR and inserted it into pmiR-RB-REPORT^TM (PMIR) vector. The activity was assayed by measuring luciferase after PMIR-3′UTR was transfected into A549 cells. Results: The sequence of hperl 3′UTR was confirmed by sequencing, and the dual luciferases could normally express when PMIR-3′UTR was transfected into A549 ceils. Conclusion: PMIR-3′UTR was successfully established.
Keywords:hperl gene  3′UTR rigion  PMIR-3′UTR
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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