| HIV-1 P24人源化单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 崔佳雯,;毛怡心,;马晶,;贾润清,;余双庆,;张晓梅,;常占军,;戴蕾,;李喜英,;牛卫东,;梁世杰,;刘征,;刘建勋,;徐兰英,;曾毅,;张晓光.HIV-1 P24人源化单克隆抗体的制备及鉴定[J].中华实验和临床病毒学杂志,2014(5):392-394. |
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| 作者姓名： | 崔佳雯 ;毛怡心 ;马晶 ;贾润清 ;余双庆 ;张晓梅 ;常占军 ;戴蕾 ;李喜英 ;牛卫东 ;梁世杰 ;刘征 ;刘建勋 ;徐兰英 ;曾毅 ;张晓光 |
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| 作者单位： | [1]北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒药理室,100022; [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;,100022; [3]郑州市疾病预防控制中心,100022; |
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| 摘 要： | 目的 通过建立新型人源化抗HIV-1 P24单克隆抗体制备技术平台,研制1～2种抗HIV-1 P24抗体.方法 使用连接P24的磁珠分选特异性分泌P24抗体的B细胞,有限稀释后,提取总mRNA,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vector AbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中;通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体;使用proteinA亲和层析纯化抗体.结果 成功筛选到5对抗HIV-1 P24的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化HIV-1 P24单克隆抗体的制备及纯化方法,为HIV早期诊断以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.
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| 关 键 词： | HIV-1 逆转录聚合酶链反应 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定 |
Preparation and identification of the HIV-1 p24 humanized monoclonal antibody |
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| Institution: | Cui Jiawen, Mao Yixin,Ma Jing, Jia Runqing, Yu Shuangqing, Zhang Xiaomei, Chang Zhanjun, Dai Lei, Li Xiying, Niu Weidong , Liang Shijie , Liu Zheng , Liu Jianxun , Xu Lan ying , Zeng Yi , Zhang X iaoguang. ( Department of Virus Pharmacology, College of Life Science and Bioengineering, Beijing University of Technology, Beifing 100022, China) |
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