| SOX9基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达 |
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| 引用本文： | Xu Y,Chen L,Zhu XS,Shi Q,Liu Y,Gu Y,Tang TS. SOX9基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达[J]. 中华医学杂志, 2010, 90(47): 3376-3380. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.47.018 |
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| 作者姓名： | Xu Y Chen L Zhu XS Shi Q Liu Y Gu Y Tang TS |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第一医院骨科,215006 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 构建SOX9基因的慢病毒载体并使其在兔骨髓间充质干细胞(MSCs)中表达.方法 通过RT-PCR获得人SOX9基因编码区(CDS)片段,将该片段克隆入质粒Pwpxl-MOD2中产生Pwpxl-MOD2/SOX9,将Pwpxl-MOD2/SOX9、pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共转染293T细胞,获得携带目的基因SOX9基因的重组病毒.同时共转染Pwpxl-MOD2,pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G进另一组293T细胞包装产生空载体慢病毒作为阴性对照.包装好的慢病毒体外感染MSCs,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及免疫印迹检测SOX9的表达;四甲基噻唑蓝(MTT)法测定慢病毒对细胞增殖能力的影响.结果 酶切、PCR及测序鉴定证实慢病毒载体质粒Pwpxl-MOD中插入片段为基因SOX9.病毒感染MSCs后,经RT-PCR法和免疫印迹证实SOX9基因在MSCs中表达.MTT法检测示慢病毒感染对骨髓间克质干细胞的生长未产生显著影响.结论 成功构建SOX9基因的慢病毒载体并感染骨髓间充质干细胞后能够稳定表达SOX9.为研究椎间盘退变的基因及生物学治疗提供了实验依据.
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| 关 键 词： | 椎间盘 遗传载体 干细胞 SOX9基因 |
Construction of lentiviral vector containing SOX9 gene and its expression in bone marrow mesenchymal stem cells |
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| Xu Yun,Chen Liang,Zhu Xue-Song,Shi Qin,Liu Yong,Gu Yong,Tang Tian-Si. Construction of lentiviral vector containing SOX9 gene and its expression in bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Zhonghua yi xue za zhi, 2010, 90(47): 3376-3380. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.47.018 |
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| Authors: | Xu Yun Chen Liang Zhu Xue-Song Shi Qin Liu Yong Gu Yong Tang Tian-Si |
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| Affiliation: | Department of Orthopedics, First Affiliated Hospital, Soochow University, Suzhou 215006, China. |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Intervertebral disk Genetic vector Stem cells SOX9 gene |
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