不同粒径聚乙二醇化维生素K1脂质体的制备及体内外评价

目的 制备不同粒径聚乙二醇化维生素K₁（VK₁）脂质体，并对其进行制剂学表征，考察体内药动学和促凝药效。方法 采用薄膜分散法制备不同粒径的VK₁脂质体，采用马尔文粒径仪测定粒径、聚合物分散性指数（PDI）、Zeta电位；透射电子显微镜观察形态；以粒径为指标，考察脂质体在4℃下储存1个月、在磷酸缓冲液（PBS，pH 6.8）及pH 1.2水溶液中48 h的稳定性；采用超滤离心法测定包封率与载药量；采用大鼠在体肠吸收模型考察肠吸收特性；ig给药考察脂质体在大鼠体内药动学行为；以华法林钠诱导大鼠低凝血酶原血症，采用ELISA试剂盒检测血浆中凝血因子II、V、VII和IX含量，检测凝血酶原时间（PT），评价不同粒径VK₁脂质体（2 mg·kg^-1）促凝效果。结果 制备了3种VK₁脂质体（Lip-180、Lip-120、Lip-60），粒径分别为（182.40±2.17） nm、（114.38±0.60） nm和（68.42±0.73） nm，PDI分别为0.21±0.01、0.12±0.00和0.17±0.01 ，电位分别为（-27.67±1.58）、（-22.93±1.81）、（-26.63±1.37）mV，脂质体均呈球形，分布均匀，包封率均>90%，载药量均>2.90%，稳定性良好。与Lip-180相比，Lip-120和Lip-60表现出更缓慢的释放性能和更好的跨膜吸收速率。Lip-120及Lip-60的药时曲线下面积（AUC_0-∞）分别是Lip-180的1.52和1.80倍，并且Lip-120与Lip-60的AUC_0-∞分别是维生素K₁注射剂（市售对照）的1.24与1.46倍。与低凝血酶原血症模型大鼠比较，经ig给药Lip-180、Lip-120、Lip-60及维生素K₁注射剂后，PT显著降低（P<0.001），凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ水平均升高，其中，Lip-60作用最显著，除给药后6 h的凝血因子Ⅹ外，均差异显著（P<0.05、0.01、0.001）。结论 聚乙二醇化VK₁脂质体分布均匀，稳定性高，释放缓慢，口服生物利用度高，体内促凝效果较好，优选粒径最小的Lip-60。

Preparation and in vitro and in vivo evaluation of PEGylated vitamin K1 liposomes with different particle sizes