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| 利用免疫共沉淀验证HT036与P311间的相互作用 | |
| 引用本文： | 袁顺宗,彭旭,马兵,王庆红,易绍萱,贺伟峰,陈希炜,胡晓红,张小容,周丽娜,罗高兴,吴军. 利用免疫共沉淀验证HT036与P311间的相互作用[J]. 第三军医大学学报, 2006, 28(24): 2400-2402 |
| 作者姓名： | 袁顺宗 彭旭 马兵 王庆红 易绍萱 贺伟峰 陈希炜 胡晓红 张小容 周丽娜 罗高兴 吴军 |
| 作者单位： | 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,4000382;第三军医大学西南医院疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆,400038 |
| 摘 要： | 目的 利用免疫共沉淀技术验证未知蛋白HT036(hypothetical protein,HT036)和P311间的相互作用.方法 构建能在哺乳动物细胞中表达带HA标签的HT036融合蛋白(HA-HT036)的重组载体pCMV-HA-HT036,经酶切鉴定正确后,和表达带Myc标签的P311融合蛋白(Myc-P311)的重组真核表达载体pCMV-Myc-p311,单独或者共转染人293细胞,利用免疫共沉淀技术验证HT036与P311间的相互作用.结果 构建的重组表达载体pCMV-HA-HT036经双酶切鉴定正确,转染293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-P311相互作用蛋白复合物后,用抗HA单克隆抗体进行Western blot检测,可以检测到HA-HT036的表达.结论 成功构建了HA-HT036融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中表达后利用免疫共沉淀技术证实HT036与P311之间存在着相互作用. |
| 关 键 词： | HT036 P311 载体构建 免疫共沉淀 相互作用 |
| 文章编号： | 1000-5404（2006）24-2400-03 |
| 收稿时间： | 2006-07-10 |
| 修稿时间： | 2006-07-102006-09-08 |
Identification of interaction between HT036 and P311 by co-immunoprecipitation |
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| YUAN Shun-zong,PENG Xu,MA Bing,WANG Qing-hong,YI Shao-xuan,HE Wei-feng,CHEN Xi-wei,HU Xiao-hong,ZHANG Xiao-rong,ZHOU Li-na,LUO Gao-xing,WU Jun. Identification of interaction between HT036 and P311 by co-immunoprecipitation[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2006, 28(24): 2400-2402 | |
| Authors: | YUAN Shun-zong PENG Xu MA Bing WANG Qing-hong YI Shao-xuan HE Wei-feng CHEN Xi-wei HU Xiao-hong ZHANG Xiao-rong ZHOU Li-na LUO Gao-xing WU Jun |
| Affiliation: | State Key Laboratory of Trauma, Burns and Combined Injury, Institute of Burns, Southwest Hospital, Third Military Medical University; 2 Chongqing Key Lab for Medical Proteomics, Chongqing 400038, China |
| Abstract: | Objective To explore the interaction between HT036(hypothetical protein HT036)and P311 by co-immunoprecipitation.Methods HA-tagged fusion protein(HA-HT036)expression vector was constructed,identified and transfected into human embryo kidney 293(HEK293)cells alone or with Myc-tagged fusion protein(Myc-P311)expression vector pCMV-Myc-p311.The interaction between P311 and HT036 was detected by co-immunoprecipitation.Results Double restriction enzyme digestion showed that pCMV-HA-HT036 was constructed correctly.When Myc-P311 was immunoprecipitated by anti-Myc antibody,HA-HT036 was identified by Western blotting with anti-HA antibody from immunoprecipitated complex.Conclusion The recombinant vector pCMV-HA-HT036 was constructed successfully.The interaction between HT036 and P311 could be identified by co-immunoprecipitation after co-expression of pCMV-HA-HT036 and pCMV-Myc-p311.The result provides an important basis for further study of the intracellular signal transduction of P311. |
| Keywords: | HT036 P311 |
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