| C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响 |
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| 引用本文： | 马涛,邱鹏新,颜光美.C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响[J].中山大学学报(医学科学版),2005,26(4):404-408. |
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| 作者姓名： | 马涛 邱鹏新 颜光美 |
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| 作者单位： | 中山大学基础医学院药理学教研室,广东,广州,510080 |
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| 摘 要： | 目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列.
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| 关 键 词： | 蛇毒纤溶酶 重组 金属蛋白酶 C端序列 删除 |
| 文章编号： | 1672-3554(2005)04-0404-05 |
| 修稿时间： | 2005年1月25日 |
Effect of Deletion of C-terminal Region on Nonhemorrhagic Recombinant Fibrin(ogen)olytic Metalloprotease |
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| MA Tao,QIU Peng-xin,YAN Guang-Mei.Effect of Deletion of C-terminal Region on Nonhemorrhagic Recombinant Fibrin(ogen)olytic Metalloprotease[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2005,26(4):404-408. |
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| Authors: | MA Tao QIU Peng-xin YAN Guang-Mei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | snake venom fibrin(ogen)olytic enzyme recombinant metalloprotease C-terminal sequence deletion |
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