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不同静水压下人椎间盘髓核细胞的形态和活性
作者姓名:刘志超  张帆  孙旗  康晓乐  袁巧妹  柳根哲  陈江
作者单位:1中国中医科学院广安门医院南区骨一科,北京市 102600;2北京中医药大学,北京市 100029;3北京中医药大学东直门医院骨伤科一区,北京市 100700;4首都医科大学附属北京中医医院骨伤科,北京市 100010;5湖南中医药大学,湖南省长沙市 410208
基金项目:国家自然科学基金项目(81603638),项目负责人:陈江;中国博士后科学基金面上项目(2019M662791),项目负责人:陈江;中央高校基本科研业务费专项资金资助(2018-JYB-XJQ010),项目负责人:陈江;北京中医药大学2017年度基本科研业务费项目(2017-JYB-JS-085),项目负责人:张帆;北京中医药大学2019年度基本科研业务费项目(2019-JYB-JS-042),项目负责人:康晓乐;北京中医大学东直门医院青苗人才项目(DZMYS-201702),项目负责人:陈江。
摘    要:背景:压应力能够引起细胞形态及活性的改变,但静水压下髓核细胞的形态和活性是否改变仍需进一步研究。 目的:研究体外静水压加载系统内人椎间盘髓核细胞形态和活性的变化。 方法:将人椎间盘髓核细胞分离培养并传3代后,在静水压加载系统0.3,1,3 MPa的静水压力环境下加压2,4,6 h后,使用倒置相差显微镜观察人椎间盘髓核细胞加压前后的形态变化及生长状况;采用透射电镜观察各组人椎间盘髓核细胞超微结构的变化及差异;使用CCK-8法检测不同静水压下人椎间盘髓核细胞的增殖活性的变化。 结果与结论:①细胞培养及传代:第1,2,3代人椎间盘髓核细胞的生长曲线呈S形,3-7 d时呈直线增殖,此阶段细胞生长最快、活力最高;第5,6代人椎间盘髓核细胞的突起呈长梭形,成长较慢,出现退化;②细胞形态:在0.3,1,3 MPa的静水压下人椎间盘髓核细胞均缩小,0.3,1 MPa下细胞细微变小,形态基本完整;3 MPa静水压下细胞缩小最明显,且细胞形态不完整,说明人椎间盘髓核细胞在0.3,1,3 MPa的静水压下加压2,4,6 h后,细胞形态在3 MPa静水压下改变最明显,而相同静水压下作用不同时间后细胞形态无明显改变;③细胞活性:在0.3 MPa静水压下,人椎间盘髓核细胞的增殖率随着时间的增加先升后降,4 h时细胞增殖率最高;在1,3 MPa静水压下随着时间的增加人椎间盘髓核细胞增殖率逐渐下降,且1 MPa静水压下细胞增殖率明显高于同一作用时间3 MPa静水压下(P < 0.05),说明适当的静水压力刺激有助于促进人椎间盘髓核细胞增殖,而长期不当过高的静水压刺激能使人椎间盘髓核细胞增殖率下降,导致椎间盘退变的发生。 https://orcid.org/0000-0002-6713-9061 (刘志超) 中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

关 键 词:静水压  椎间盘  髓核细胞  形态  细胞活性  生长动力学  
收稿时间:2020-06-06
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