| 硼替佐米联用obatoclax协同诱导人急性B淋巴细胞白血病细胞株Nalm-6细胞凋亡 |
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| 作者姓名： | 戴丽霞 李亦蕾 余乐 |
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| 作者单位： | 1. 南方医科大学药学院广东省新药筛选重点实验室, 器官衰竭防治国家重点实验室, 广州 510515;2. 南方医科大学南方医院增城分院药学部, 广州 511300;3. 南方医科大学南方医院药剂科, 广州 510515*通信作者 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81773773），广州市科技计划项目（201607010350）. |
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| 摘 要： | 目的 探讨硼替佐米分别与3种Bcl-2抑制剂（obatoclax、AT-101、ABT-199）联用诱导人急性B淋巴细胞株Nalm-6细胞凋亡的协同作用。方法 应用MTT法分别检测3种Bcl-2抑制剂单用或联用硼替佐米作用于Nalm-6细胞48 h后的细胞活力。通过流式细胞术和蛋白质印迹分析分别检测不同药物单独或联合作用于Nalm-6细胞后的细胞凋亡情况及Bcl-2家族蛋白、泛素、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）、p62、免疫球蛋白结合蛋白（Bip）、磷酸化p38、磷酸化JNK、C/EBP同源蛋白（CHOP）等蛋白的表达情况。同时利用qRT-PCR检测硼替佐米和obatoclax联用后细胞的内质网应激反应关键基因Bip、CHOP、活化转录因子（ATF）4、ATF6、肌醇需求酶1α（IRE1α）、X-盒结合蛋白1（XBP1）的表达水平。最后通过MTT和流式细胞术检测内质网应激反应抑制剂牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）是否可以逆转两药联用诱导的细胞凋亡。结果 硼替佐米和3种Bcl-2抑制剂单用均可降低Nalm-6细胞的存活率。3组药物联用实验组中，仅有obatoclax＋硼替佐米表现出协同细胞毒性作用，其余两组并无此现象。Obatoclax通过增加LC3B-Ⅱ、p62蛋白的表达水平抑制Nalm-6细胞的自噬活性。与单药相比，硼替佐米和obatoclax联用后泛素化蛋白的表达显著上调。硼替佐米联用obatoclax可同时抑制自噬和泛素蛋白酶体活性，造成大量蛋白蓄积，进而激活内质网应激反应，最终诱导Nalm-6细胞凋亡。内质网应激抑制剂TUDCA可削弱硼替佐米和obatoclax联用诱导的细胞凋亡。结论 硼替佐米联用obatoclax可同时抑制自噬和蛋白酶体活性，并激活内质网应激反应协同诱导人急性B淋巴细胞白血病细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 急性B淋巴细胞白血病 硼替佐米 obatoclax 协同作用 自噬 内质网应激 |
| 收稿时间： | 2019/10/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/1/18 0:00:00 |
Synergistic cytotoxic effect of bortezomib in combination with obatoclax on human acute B lymphoblastic leukemia cell line Nalm-6 |
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| Authors: | DAI Li-xi LI Yi-lei YU Le |
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| Institution: | 1. State Key Laboratory of Organ Failure Research, Guangdong Provincial Key Laboratory of New Drug Screening, School of Pharmaceutical Sciences, Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong, China;2. Department of Pharmacy, Zengcheng Branch of Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 511330, Guangdong, China;3. Department of Pharmacy, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong, China*Corresponding authors |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | acute B lymphoblastic leukemia bortezomib obatoclax synergy autophagy endoplasmic reticulum stress |
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