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抑制miR-21表达对结肠癌HCT116细胞生物学行为的影响
作者姓名:熊兵红  马利  程勇  张才全
作者单位:重庆医科大学附属第一医院 普外科,重庆市普外科学重点实验室,重庆 400016;重庆市巴南区第二人民医院内科,重庆 400054;重庆医科大学附属第一医院 普外科,重庆市普外科学重点实验室,重庆 400016;重庆医科大学附属第一医院 普外科,重庆市普外科学重点实验室,重庆 400016
基金项目:重庆市自然科学基金资助项目(No. csts2012JJA0038)
摘    要:目的:探讨抑制 miR-21 表达对结肠癌HCT116细胞增殖、周期、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为的影响。方法:实验分为3组,以miR-21抑制剂转染HCT116细胞为转染抑制组(IN),另设阴性对照组(NC)、空白对照组(MOCK),以Real-time PCR检测转染后HCT116细胞中miR-21的表达,应用MTT法、流式细胞术、Transwell侵袭和迁移实验检测转染后HCT116细胞的增殖、周期、凋亡、侵袭、迁移;以Western blotting检测转染后HCT116细胞PTEN的表达,荧光素酶报告实验检测转染后HCT116细胞PTEN的活性。结果:miR-21抑制剂转染后,HCT116细胞中miR-21的表达较NC和MOCK组细胞明显降低。下调miR-21后,HCT116细胞的增殖能力明显降低\[72 h时:(1.05±0.45) vs (1.43±0.02),(1.45±0.01);t=13.83,P=0000 159;t=14.88,P=0.000 119\],细胞凋亡率显著增加\[(16.30±1.00)% vs(1.87±0.53)%,(1.86±0.12)%;t=25.01,P=0.000 015 2;t=24.985,P=0.000 015 2\],细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞的侵袭\[(50±2.0) vs (115±3.0),(111±3.0)个;t=29.09,P=0.000 008 31;t=31.23,P=0.000 006 27\]和迁移能力\[(22±2.0) vs (52.3±2.5),(53.0±1.0)个;t=2401,P=0.000 017 8;t=16.34,P=0.000 082 0\]明显下降。miR-21抑制剂转染的HCT116细胞中PTEN的表达及其荧光素酶相对活性均显著增加。结论:miR-21可能通过抑制PTEN进而调控大肠癌细胞生物学行为,PTEN可能是miR-21的靶基因之一。

关 键 词:miR-21  大肠癌  生物学行为  PTEN
收稿时间:2013-11-30
修稿时间:2014-01-15
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