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富含多糖的植物组织miRNA提取方法的改进
引用本文:罗茂,李蓉,张春,罗波. 富含多糖的植物组织miRNA提取方法的改进[J]. 泸州医学院学报, 2013, 36(1): 6-9
作者姓名:罗茂  李蓉  张春  罗波
作者单位:1. 泸州医学院药物与功能性食品研究中心,四川泸州,646000
2. 泸州医学院药物与功能性食品研究中心药学院,四川泸州,646000
3. 泸州医学院药物与功能性食品研究中心生物化学教研室,四川泸州,646000
基金项目:国家自然科学基金(81001700);四川省教育厅课题(11ZB123、12ZB057、11ZB124);四川省卫生厅课题(120371)
摘    要:目的:建立冻融法结合小分子RNA分离试剂盒简便快速提取富含多糖的植物组织miRNA的方法.方法:利用乙醇/醋酸钾沉淀法、小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取方法和结合反复冻融法改进的小分子RNA分离提取方法分别提取玉米胚乳组织小分子RNA,通过小分子RNA浓度、纯度及完整性检测,以及内参5s rRNA扩增验证模板真实性等比较3类方法小分子RNA的提取效果.结果:乙醇/醋酸钾沉淀法易丢失大量小分子RNA;小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取所获小分子RNA浓度、纯度较低,富含大量多糖杂质;反复冻融法结合小分子RNA分离试剂盒提取的小分子RNA浓度、纯度较高,有效去除多糖杂质,内参5s rRNA扩增验证真实性表明其所获miRNA的cDNA模板质量较高.结论:结合反复冻融法和小分子RNA分离试剂盒,可以简便快速去除多糖内杂质,保证小分子RNA完整性,加尾及引物延伸RT-PCR、所获miRNA的cDNA模板质量较高,可用于后续miRNA实验研究.

关 键 词:玉米胚乳  小分子RNA提取  miRNA  加尾及引物延伸RT-PCR

Improvement of extraction method of miRNA from plant tissue with abundant polysaccharides
Luo Mao , Li Rong , Zhang Chun , Luo Bo. Improvement of extraction method of miRNA from plant tissue with abundant polysaccharides[J]. Journal of Luzhou Medical College, 2013, 36(1): 6-9
Authors:Luo Mao    Li Rong    Zhang Chun    Luo Bo
Affiliation:2 Drug Discovery Research Center,1Pharmacy Academy;2Department of Biochemistry,Luzhou Medical College
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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