| 角膜内皮细胞改良培养技术的初步探讨 |
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| 引用本文： | 胡晓琴,袁进,陈家祺,周辉,周世有,王智崇.角膜内皮细胞改良培养技术的初步探讨[J].眼科研究,2008,26(5):321-325. |
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| 作者姓名： | 胡晓琴 袁进 陈家祺 周辉 周世有 王智崇 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学医学院,330006
2. 中山大学中山眼科中心,眼科学国家重点实验室,广州,510060 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)眼科重大专项基金
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广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 评价角膜后弹力层撕除联合酶消化法分离角膜内皮细胞的效率,分析细胞体外生长的生物学特性.方法 将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层完整撕下,用胰蛋白酶-EDTA联合酶消化,纯化的角膜内皮细胞进行体外培养.观察细胞形态,用神经元烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定.苏木精-伊红染色以及茜素红-台盼蓝联合染色分析细胞活性,流式细胞仪检测细胞体外生长过程中Anne xiv-PE的表达情况,透射电镜和扫描电镜进行细胞超微结构形态的观察.结果 带角膜内皮细胞的后弹力层撕除联合酶消化法可快速获得大量纯化的角膜内皮细胞,快速贴壁生长并增生,体外培养3～4d即融合成单层细胞,且表达神经元烯醇化酶抗体阳性,苏木精-伊红染色及活性染色提示细胞功能良好,Annexiv-PE抗体表达水平微弱.结论 角膜后弹力层撕除联合酶消化法可提高角膜内皮细胞的获取和培养效率,为工程化角膜内皮移植膜的构建提供稳定的种子细胞来源.
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| 关 键 词： | 角膜内皮细胞 后弹力层撕除 细胞培养 角膜内皮细胞 改良 培养技术 corneal endothelial cells culture method of modified 细胞来源 种子 稳定 移植膜 工程化 培养效率 表达水平 抗体阳性 细胞功能 活性染色 烯醇化酶 单层细胞 合成 |
| 文章编号： | 1003-0808(2008)05-0321-05 |
| 修稿时间： | 2008年1月16日 |
Exploration of a modified method of culture corneal endothelial cells |
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| Hu Xiaoqin,Yuan Jin,Chen Jiaqi,Zhou Hui,Zhou Shiyou,Wang Zhichong.Exploration of a modified method of culture corneal endothelial cells[J].Chinese Ophthalmic Research,2008,26(5):321-325. |
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| Authors: | Hu Xiaoqin Yuan Jin Chen Jiaqi Zhou Hui Zhou Shiyou Wang Zhichong |
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