| 幽门螺杆菌Mr 26 000外膜蛋白编码基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 姜政,黄爱龙,陶小红,王丕龙,蒲丹. 幽门螺杆菌Mr 26 000外膜蛋白编码基因的克隆及表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2002, 18(4): 376-379 |
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| 作者姓名： | 姜政 黄爱龙 陶小红 王丕龙 蒲丹 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学第一附属医院消化科,重庆,400016
2. 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010 |
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| 摘 要： | 目的 构建含幽门螺杆菌 (Hp)Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因的重组载体 ,并在E .coliBL2 1中表达。方法 用PCR从Hp染色体中 ,扩增Mr 2 6 0 0 0外膜蛋白编码基因片段。将目的基因与pET32a(+)同时经BamHI、HindⅢ双酶切、纯化、连接后 ,构建含有目的基因的重组载体。以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL2 1(DE30 )并表达。表达产物经纯化后 ,用ELISA法检测其抗原性。结果 经酶切、测序分析表明 ,插入的基因片段为HpMr 2 6 0 0 0的外膜蛋白编码基因 ,与Tomb等的报道相比较 ,有 1.1%的bp发生变异 ,1.5 1%的氨基酸残基改变。经SDS PAGE分析发现 ,融合基因表达的蛋白Mr为 4 6× 10 3 ,可溶性表达产物占细菌总蛋白的 38.96 %。重组蛋白经Ni NTA琼脂糖树脂纯化后 ,其纯度达 95 %以上。ELISA法检测显示 ,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清所识别 ,具有良好的抗原性。结论成功地克隆并表达Mr为 2 6 0 0 0的Hp外膜蛋白编码基因 ,为Hp蛋白疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究打下了基础
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 外膜蛋白基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1007-8738(2002)04-376-04 |
Cloning and expression of gene encoding Helicobacter pylori outer membrane protein with Mr 26 000 |
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| JIANG Zheng ,HUANG AI long ,TAO Xiao hong ,WANG Pi long ,PU Dan. Cloning and expression of gene encoding Helicobacter pylori outer membrane protein with Mr 26 000[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2002, 18(4): 376-379 |
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| Authors: | JIANG Zheng HUANG AI long TAO Xiao hong WANG Pi long PU Dan |
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| Affiliation: | JIANG Zheng 1,HUANG AI long 2,TAO Xiao hong 1,WANG Pi long 1,PU Dan 1 1 Department of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital, 2 Institute of Viral Hepatitis,Chongqing Medical University,Chongqing 4 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | helicobacter pylori outer membrane protein gene prokaryotic expression |
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