二苯乙烯苷通过影响APP 代谢途径减少斑块沉积进而影响学习记忆功能

目的：评价二苯乙烯苷（2，3，4’，5-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG）在长期给药过程中对APP/PS1 小鼠学习记忆功能的影响及其对阿尔茨海默病病理改变的影响，同时比较其与多奈哌齐药效学及药理作用的不同。方法：给APP/PS1 小鼠灌胃给药（TSG，50 mg·kg-1，100 mg·kg-1；donepezil，1 mg·kg-1）在给药后用Morris 水迷宫实验，新物体识别实验，自主活动，评价小鼠的学习记忆功能及小鼠的活动性。硫磺素染色和Aβ40/42 免疫荧光共定位观察全脑斑块沉积，免疫组化染色观察皮层和海马部位斑块沉积情况，ELISA 方法检测脑内可溶及不可溶Aβ42 的含量，用Western Blot 方法检测皮层及海马部位Aβ生成及代谢途径的关键酶的含量，以此来判断TSG 药物在改善老年痴呆的作用及其作用的关键点。结果：Morris 水迷宫实验结果显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比逃避潜伏期明显延长，给药后逃避潜伏期明显缩短，TSG 与DON 相比，逃避潜伏期更短。新物体识别实验显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比分辨指明显缩短，给药后分辨指数提高，TSG 与DON 相比，分辨指数明显提高。硫磺素染色与Aβ40/42 免疫荧光共定位，斑块能够完全重合，说明斑块的主要成分是Aβ40/42，实验结果统计分析APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比脑内斑块显著，给药后全脑斑块减少，以小剂量最为显著，Don 也能减少斑块沉积，减少程度较TSG 稍差。免疫组化染色皮层斑块沉积，APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比皮层斑块显著，给药后皮层斑块减少；免疫组化染色海马斑块沉积，APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比海马斑块显著，给药后海马斑块减少。另外Western Blot 检测了Aβ代谢通路，前体蛋白和关键代谢酶，给药后APP，BACE-1，PS1 表达量减低。用ELISA 方法检测脑内可溶及不可溶性Aβ42 的含量，结果显示APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比可溶性Aβ42 含量明显增高，给药后有一定程度减低；不可溶性Aβ42，APP/PS1 模型组与Wild Type 对照组相比明显增加。给药后不可溶性Aβ42明显减低，DON 对不可溶性Aβ42 的脑内含量减低，效果与TSG 相比不明显。结论：TSG 在长期给药后能够改善小鼠的空间学习记忆功能，对斑块所导致的记忆功能减退，有显著的提高作用，而与TSG 相比DON 的改善学习记忆能力更为显著。TSG 对小鼠的活动能力无不良影响。TSG 能够减少斑块沉积，其中不可溶性Aβ42 减低最为明显。进一步研究Western Blot 结果显示TSG 能够减少APP 的表达，在板块生成途径能够影响关键代谢酶BACE-1 和PS1。TSG 长期药效优于DON。