D-氨基酸氧化酶/D-丙氨酸系统杀伤K562e细胞的作用机制探讨 |
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引用本文: | 翟勇平,王健民,张雨生,吕书晴.D-氨基酸氧化酶/D-丙氨酸系统杀伤K562e细胞的作用机制探讨[J].第二军医大学学报,2002,23(2). |
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作者姓名: | 翟勇平 王健民 张雨生 吕书晴 |
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作者单位: | 1. 南京军区南京总医院血液科,南京,210002 2. 第二军医大学长海医院血液科,上海,200433 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,上海市优秀学科带头人项目 |
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摘 要: | 目的:探讨D-氨基酸氧化酶( DAAO)/D-丙氨酸(D-Ala)系统用作自杀基因治疗白血病的作用机制. 方法: HT5"SS〗以D-Ala杀伤稳定表达DAAO和绿荧光蛋白(GFP)的高致瘤性K562e单克隆细胞K DfGd、KDfGC,应用MTT法检测细胞存活率,并用酚红氧化法测定培养上清H2O 2和Lowry法测定细胞蛋白数量,流式细胞仪测定细胞GFP的荧光强度.结果:在25 mmol/L D-Ala作用下24 h即可完全杀死KDfGd细胞,当 D-Ala为20 mmol/L时延长作用时间至48 h,杀伤率由64%增加至96.8%,而D -Ala≤15 mmol/L时杀伤率增加不明显.低于20 mmol/L,D-Ala 对K562e几乎无杀伤作用.培养上清的H2O2变化与杀伤转基因细胞作用相一致.结论:DAAO/D-Ala系统可能是通过产生H2O2发挥杀伤转基因K562e白血病细胞的作用 .
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关 键 词: | D-氨基酸氧化酶、丙氨酸、过氧化氢、白血病 |
Study on mechanism of D-amino acid oxidase/D-Alanine system on killin g K562e cell in vitro |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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