血管内皮生长因子促进小鼠胚胎干细胞的造血分化

目的：研究血管内皮生长因子(VEGF)体外促进小鼠胚胎干细胞系ES-D3向造血分化的能力。方法：先将ES-D3形成拟胚体,将拟胚体细胞转入含不同浓度的VEGF和VEGF+SCF的培养基中。实验分6组,分别为VEGF5μg/L组、VEGF10μg/L组、VEGF20μg/L组、VEGF5μg/L＋SCF组、VEGF10μg/L＋SCF组、VEGF20μg/L＋SCF组,同时设不加因子的自发分化对照组。RT-PCR检测造血转录基因GATA-2和早期造血细胞基因c-kit和β-H1的表达,流式细胞仪检测CD34+细胞,甲基纤维素半固体培养法检测生成造血集落的能力。结果：经过1周的诱导培养,实验组生成的细胞可以表达GATA-2、c-kit和β-H1,CD34＋细胞的比例也升高,并可形成造血祖细胞的集落。从诱导生成CD34＋细胞的比例和生成的集落数量看,VEGF联合SCF组的诱导效率要高于VEGF单用组和对照组,其中以VEGF20μg/L＋SCF组和VEGF10μg/L＋SCF组的诱导效率最高。结论：VEGF能够促进ESC的早期造血分化,尤以与SCF合用时,其诱导效率更高。