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实时荧光环介导等温扩增检测 HIV-1 DNA反应体系的建立
引用本文:厉小玉,张永乐,潘克女,吴亦栋,陈刚,周俊. 实时荧光环介导等温扩增检测 HIV-1 DNA反应体系的建立[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2013, 0(8)
作者姓名:厉小玉  张永乐  潘克女  吴亦栋  陈刚  周俊
作者单位:1. 310014,杭州市儿童医院检验科
2. 检验科, 杭州市西溪医院分子诊断实验室,310023
基金项目:杭州市医疗科研及重点专科专病项目
摘    要:
目的建立一种快速、敏感度高的实时荧光环介导等温定量检测HIV-1 DNA的方法。方法根据HIV病毒基因序列选择6个保守区域设计4条环介导等温扩增( LAMP)引物,建立环介导等温扩增体系,同时在体系中加入SYBR GreenⅠ荧光染料,并评价该方法的特异性和敏感度。结果成功合成实时荧光环介导等温定量检测HIV-1 DNA反应体系,检测200例HIV感染者外周淋巴细胞HIV-1 DNA,其中有195例阳性,并检测50例健康对照结果均阴性。其中有HIV-1 DNA定量结果显示最低含量为51拷贝/ml,最高含量为8.21×106拷贝/ml,平均值含量为5.78×105拷贝/ml,其中病毒含量比较集中在105数量级范围,共162例占83.08%。采用10倍稀释法发现该方法最低检出限为50拷贝/ml。对乙型肝炎病毒、疱疹病毒、丙型肝炎病毒进行交叉实验结果均为阴性。结论HIV感染者外周血中几乎都存在HIV-DNA,实时荧光环介导等温扩增是一种快速、敏感度高、特异性强的方法,适合各级医院的临床检测。

关 键 词:环介导等温扩增  艾滋病病毒  快速检测

Establishment of real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification assay for rapid detec-tion of HIV-1 DNA
LI Xiao-yu , ZHANG Yong-le , PAN Ke-nü , WU Yi-dong , CHEN Gang , ZHOU Jun. Establishment of real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification assay for rapid detec-tion of HIV-1 DNA[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2013, 0(8)
Authors:LI Xiao-yu    ZHANG Yong-le    PAN Ke-nü    WU Yi-dong    CHEN Gang    ZHOU Jun
Abstract:
Keywords:Loop-mediated isothermal amplification  HIV  Rapid detection
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