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基于ITS2序列鉴定谷物芽类药材及其混伪品
作者姓名:熊超  周红  贺海波  胡志刚  刘合刚
作者单位:湖北中医药大学药学院 武汉 430065;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所 北京 100193;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;湖北中医药大学药学院 武汉 430065;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;湖北中医药大学药学院 武汉 430065
基金项目:科学技术部国家重大新药创制科技专项(2014ZX09304307001-021):中药新药安全性检测技术与标准研究-中药原料药混伪品分子基因鉴定技术与标准,主课题负责人:肖红斌,子课题负责人:胡志刚;国家自然科学基金委重点项目(81130069):道地药材形成的生物学实质,负责人:陈士林。
摘    要:目的:应用ITS2序列对2010版《中国药典》谷物芽类药材稻芽、谷芽、麦芽及其混伪品进行分子鉴定,以保证药材质量和临床疗效。方法:提取稻芽、谷芽和麦芽药材DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用CodonCode Aligner软件对测序峰图进行校对拼接,并去除低质量序列及引物区,得到ITS2序列。用MEGA6.0软件对所有10个物种74条序列计算种内和种间K2P(Kimura 2-Parameter)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)树。结果:稻芽、谷芽和麦芽的基原植物稻、粟和大麦的种内最大K2P遗传距离均远小于其与混伪品之间的种间最小K2P遗传遗传距离;NJ树结果显示稻、粟和大麦各自聚为一支,均与混伪品明显区分开,各混伪品物种也单独聚为一支。结论:ITS2序列能准确鉴别稻芽、谷芽、麦芽药材及其混伪品,该研究为保障谷物芽类药材临床准确用药提供了新的技术手段。

关 键 词:谷物芽类药材 ITS2序列 鉴定 混伪品
收稿时间:2014-11-05
修稿时间:2014-11-15
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