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细小种子类毒性药材天仙子的DNA 条形码鉴定
作者姓名:凃媛  熊超  师玉华  明孟碟  胡志刚  黄必胜
作者单位:湖北中医药大学药学院 武汉 430065;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;湖北中医药大学药学院 武汉 430065;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;湖北中医药大学药学院 武汉 430065;湖北中医药大学药学院 武汉 430065;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;湖北中医药大学药学院 武汉 430065
基金项目:科学技术部国家重大新药创制科技专项(2014ZX09304307001-021):中药新药安全性检测技术与标准研究-中药原料药混伪品分子基因鉴定技术与标准,主课题负责人:肖红斌,子课题负责人:胡志刚;国家自然科学基金委重点项目(81130069):道地药材形成的生物学实质,负责人:陈士林。
摘    要:目的:毒性中药的误用滥用对人类健康造成了严重危害。本研究应用DNA条形码技术对细小种子类毒性药材天仙子及其混淆品进行鉴定,为中药材的安全使用提供保障。方法:使用试剂盒提取61份样本的总DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用Codon Code Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,去除低质量序列及引物区获得ITS2 序列。用MEGA 6.0 软件计算物种种内和种间Kimura2-Parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树。结果:天仙子的基原植物莨菪种内最大K2P遗传距离为0.005,远小于其与混淆品之间的种间最小K2P遗传距离(0.360);NJ树结果显示莨菪独自聚为一支,表现出良好的单系性,与混淆品明显区分开。结论:ITS2序列能准确鉴别毒性药材天仙子及其混淆品,为保障临床用药的安全提供了有效的技术手段。

关 键 词:天仙子 毒性药材 ITS2序列 鉴定
收稿时间:2014-11-05
修稿时间:2014-11-15
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