双链DNA直接测序法在环境诱变剂致突变分子机制研究中的应用Ⅰ.非突变质粒抗性基因片段的序列测定 |
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作者姓名: | 高惠兰 谢大英 李忠生 左瑾 方福德 |
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作者单位: | 中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所(高惠兰,谢大英,李忠生),中国医学科学院基础医学研究所(左瑾),中国医学科学院基础医学研究所(方福德) |
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摘 要: | 本文报告了双链DNA直接测序法的建立,并以质粒pBR322为研究对象,选择其四环素抗性基因作为模板,合成了一个位于E.coRI位点逆时针方向紧邻处的寡核苷酸5′-GGCCCTTTCGTCTTC-3′作为引物。整个测序主要步骤包括:双链DNA碱变性、酶促合成反应和双脱氧末端终止法。结果显示,在非梯度胶的情况下,可以清晰可靠地读出200多个核苷酸顺序。
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关 键 词: | 环境诱变剂 双链DNA 直接测序 |
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