HBV DNA C区BCP双突变PCR-FP检测方法的建立及其临床应用 |
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引用本文: | 郭晏海,吕贯庭,白玉洁,赵锦荣,张菊,闫小君. HBV DNA C区BCP双突变PCR-FP检测方法的建立及其临床应用[J]. 陕西医学杂志, 2003, 32(6): 489-491 |
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作者姓名: | 郭晏海 吕贯庭 白玉洁 赵锦荣 张菊 闫小君 |
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作者单位: | 第四军医大学全军基因诊断技术研究所,西安,710032 |
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摘 要: | 目的 :建立简便的 HBV DNA序列中 BCP双突变的检测方法。方法 :采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测。首先对 HBVC区基因进行 PCR扩增 ,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交 ,使探针的 3’端可以在 DNA聚合酶的催化下 ,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的 d NTP,然后检测该3’端带有荧光素的探针 ,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸。结果 :该方法可以检测出 HBV基因序列中 BCP双突变核苷酸类型 ,可以检测 1个拷贝的模板 ,并且可以从 BCP野生型株 DNA序列中检出 5 % BCP双突变 DNA序列 ,对 76例 HBV DNA阳性患者进行检测 ,结果 HBV BCP基因双突变率为 5 3.9( 4 1 /76)。结论 :该技术可以对血清中 HBV DNA C区 BCP双突变。
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关 键 词: | 脱氧核糖核酸 病毒/分析 @PCR-FP 突变 |
修稿时间: | 2003-01-02 |
The establishment of detection of the double mutants of the basal core promoter (BCP) of HBV by PCR-Fluorescence polarization (FP)and its clinical application |
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Abstract: |
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