重组人促红细胞生成素对离体培养视网膜神经节细胞的影响

目的研究重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoiain，rhEPO）对培养的视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）存活、突起生长及生长相关蛋白43（growth associmed protein43，GAP-43）表达的影响，探讨rhEPO对培养RGCs可能的作用机制。方法分别用DMEM及含有rhEPO的DMEM对RGCs进行离体培养，观察RGCs在体外存活的时间，测量2d、4d、6dRGCs的最长突起长度；免疫细胞化学检测GAP-43蛋白表达，并测定平均灰度值。结果DMEM组离体培养RGCs于6～8d死亡，而rhEPO组RGCs能存活10～12d，存活时间较DMEM组显著延长（P〈0．01）。培养2d、4d、6d时，DMEM组最长突起长度依次为（42．90±4．71）μm、（79．74±8．49）μm、（110．02±10．79）μm，rhEPO组依次为（55．47±7．07）μm、（100．16±7．78）μm、（118．63±11．50）μm，培养2d、4d时rhEPO组与DMEM组相比差异非常显著（P〈0．01），6d时差异显著（P〈0．05）。2组细胞在培养2d时GAP-43蛋白的表达水平较高，4d时GAP-43蛋白表达到高峰。6d时GAP-43蛋白的表达水平明显降低。各时间点rhEPO组RGCsGAP-43蛋白的表达均较DMEM组有明显增高，与DMEM组相比均有非常显著差异（P〈0．01）。结论rhEPO可延长离体培养RGCs的存活时间和促进其突起的生长。上调离体培养RGCs GAP-43蛋白的表达。rhEPO促进RGCs突起生长的作用可能通过上调RGCs GAP-43蛋白的表达来实现。[眼科新进展2007；27（3）：138-192]

Effect of recombinant human erythropoietin on retinal ganglion cells cultured in vitro