| 成人睾丸支持细胞分离方法的建立及在胰岛移植中的应用 |
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| 引用本文： | 李杨,薛武军,宋焕瑾,冯新顺,田晓辉,丁小明,宋勇,丁晨光.成人睾丸支持细胞分离方法的建立及在胰岛移植中的应用[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(6). |
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| 作者姓名： | 李杨 薛武军 宋焕瑾 冯新顺 田晓辉 丁小明 宋勇 丁晨光 |
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| 基金项目： | 陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项计划资助项目，国家自然科学基金项目，卫生部临床重点学科资助项目，陕西省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立成人睾丸支持细胞简便高效分离方法,并应用于胰岛移植。方法:A组采用胰蛋白酶、DNA酶、胶原酶、透明质酸酶一步消化法;B组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,胶原酶和透明质酸酶第二步消化;C组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,透明质酸酶第二步消化,胶原酶第三步消化。采用形态学观察和免疫组化鉴定支持细胞;MTT法和流式细胞术(FCM)测定3组支持细胞的活性和纯度;Western blot检测3组支持细胞Fas-L的表达;比较3组支持细胞与胰岛共移植至糖尿病鼠的效果。结果:经鉴定,分离的细胞具有支持细胞的特征;方法A和B分离的支持细胞数量较多,方法B和C分离的支持细胞杂质较少;MTT法检测结果显示,B组支持细胞活性显著高于A组和C组(P0.05);Western blot结果显示,B组支持细胞Fas-L的表达水平显著高于A组和C组(P0.05);FCM检测3种方法分离的S支持细胞纯度分别为(85.2±1.8)%、(92.3±2.5)%、(93.1±2.6)%,B组和C组的支持细胞纯度显著高于A组(P0.05);将3组支持细胞与胰岛共移植至糖尿病鼠模型肾包膜下,B组胰岛移植物存活时间显著高于单独胰岛移植组和A、C两组(P0.05)。结论:采用两步消化法能够获得纯度和活性较高的支持细胞,其与胰岛共移植能够显著延长移植物存活。
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| 关 键 词： | 支持细胞 分离 胰岛 移植 |
Comparison of different isolation methods on adult Sertoli cells co-transplanted with islets |
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| LI Yang,XUE Wu-jun,SONG Huan-jin,FENG Xin-shun,TIAN Xiao-hui,DING Xiao-ming,SONG Yong,DING Chen-guang.Comparison of different isolation methods on adult Sertoli cells co-transplanted with islets[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2010,26(6). |
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| Authors: | LI Yang XUE Wu-jun SONG Huan-jin FENG Xin-shun TIAN Xiao-hui DING Xiao-ming SONG Yong DING Chen-guang |
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