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小鼠骨髓基质干细胞的鉴定及体外诱导分化为肝细胞的可行性
引用本文:刘焱,李江利,施晓雷,方胜,仇毓东.小鼠骨髓基质干细胞的鉴定及体外诱导分化为肝细胞的可行性[J].世界华人消化杂志,2008,16(36):4051-4055.
作者姓名:刘焱  李江利  施晓雷  方胜  仇毓东
作者单位:南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科江苏省南京市,210008
基金项目:国家自然科学基金资助项目
摘    要:目的:分离、鉴定小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)并探讨在体外多种细胞因子的诱导下分化为肝细胞的可行性.方法:获取小鼠骨髓干细胞,进行体外贴壁培养、纯化,观察不同传代次数细胞形态特点.流式细胞法检测不同传代细胞的表面标志物CD45和CD90.分离后的MSCs再经含有HGF,FGF-4,EGF三种细胞因子的诱导体系继续培养21 d,分别以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测诱导后细胞的白蛋白(ALB)、细胞角化蛋白18(Cg18)、以及甲胎蛋白(AFP)在基因和蛋白水平的表达.结果:培养的骨髓干细胞随传代次数增多细胞形态趋向为长梭形.传代到第5代,基质干细胞的表面标志CD90阳性细胞从原代的25.42%增加到93.47%,造血干细胞的表面标志CD45表达阳性细胞从原代的86.49%降低到2.77%.通过RT-PCR可检测出诱导第7天细胞表达AFP mRNA,ALB mRNA及CK18 mRNA;通过Western blot可检测出诱导第21天的细胞表达ALB和CK18.结论:小鼠MSCs可以在体外被有效地分离纯化,可以被诱导为表达肝细胞表面标志的肝细胞样细胞.

关 键 词:骨髓基质干细胞  肝细胞  诱导分化  半定量逆转录聚合酶链反应

Identification and differentiation into hepatocyte-lIκe cells of mouse marrow stromal stem cells in vitro
Yan Liu,iang-Li Li,Xiao-Lei Shi,Sheng Fang,Yu-Dong Qiu.Identification and differentiation into hepatocyte-lIκe cells of mouse marrow stromal stem cells in vitro[J].World Chinese Journal of Digestology,2008,16(36):4051-4055.
Authors:Yan Liu  iang-Li Li  Xiao-Lei Shi  Sheng Fang  Yu-Dong Qiu
Abstract:
Keywords:
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