氨氯地平对兔主动脉PDGF-A表达的影响

1 对象和方法实验分为3组(每组3只),正常对照组:普通饲料喂养大白兔;动脉硬化组:高脂肪、高胆固醇饲料喂养的动脉硬化模型兔(吉林省科技开发中心提供);氨氯地平组:动脉硬化模型兔服用氨氯地平(美国辉瑞Pfizer公司).3 mg/(kg·d),连续6 wk后,活体分离兔主动脉壁,液氮速冻后研碎.向1g组织碎末中加入5 mL异硫氰酸胍变性溶液,混匀,用16号针头低温下反复抽吸裂解液,直至溶液不再粘稠,加0.5 mL的2 mol/L乙酸钠(pH 4.0),5 mL饱和酚和1 ml氯仿-异戊醇混合液(49:1),混匀,冰浴15 min,沉降、离心、干燥后,采用紫外分光光度法测量所提取的组织中RNA的A260nm值和A280nm值,通过甲醛·琼脂糖凝胶电泳分离RNA.用含有DNA探针(100 ng/mL)的杂交液,经过转膜、预杂交、杂交、滤膜及显色反应,对主动脉壁平滑肌细胞的RNA进行斑点和Nouthern杂交.对各组检测结果进行分析.