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| 血清MMP9蛋白ELISA检测方法的建立及在肝癌患者血清检测中的初步应用 | |
| 引用本文： | 高晨,李锋,周伟,杨小洁,石琦,刘长利,姜慧英,毕新宇,杨建国,胡敬群,韩俊,董小平. 血清MMP9蛋白ELISA检测方法的建立及在肝癌患者血清检测中的初步应用[J]. 中华检验医学杂志, 2007, 30(3): 288-291 |
| 作者姓名： | 高晨 李锋 周伟 杨小洁 石琦 刘长利 姜慧英 毕新宇 杨建国 胡敬群 韩俊 董小平 |
| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京,100052 2. 中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所 3. 北京市红十字血液中心 |
| 基金项目： | 国家高科技研究发展计划项目（2002AA215021）. |
| 摘 要： | 目的建立基质金属蛋白酶9（MMP9）的双抗体夹心ELISA检测方法，探讨血清中MMP9在正常人及肝癌患者中的差异。方法从人肝组织中经过反转录扩增出MMP9基因721—1156bp区段，插入到原核表达质粒pQE30中，在大肠埃希菌M15中诱导蛋白表达。以纯化的融合蛋白HIS—MMP9为抗原免疫实验用兔及豚鼠，得到的MMP9抗血清经过纯化后，建立双抗体夹心ELISA法。对227份正常及193份肝癌患者血清中的MMP9进行检测。结果SDS—PAGE显示所表达的HIS—MMP9融合蛋白相对分子质量约为17000；以原核表达蛋白为抗原制备的MMP9抗血清可有效地识别重组MMP9和中性粒细胞和HepG2细胞内源性MMP9蛋白；利用建立的MMP9 ELISA检测技术发现肝细胞癌患者血清中MMP9的含量高于正常人群，差异具有统计学意义，P〈0．001。结论建立的双抗体夹心ELISA方法可用于血清MMP9的检测，为建立以MMP9为检测指标的肝细胞癌患者转移复发筛查方法提供了科学基础。 |
| 关 键 词： | 癌 肝细胞 基质金属蛋白酶类 酶联免疫吸附测定 |
| 收稿时间： | 2006-07-31 |
Establishment of a sandwich ELISA method for detection of matrix metalloproteinase 9 protein in sera samples and preliminary application for hepatocellular carcinoma patients |
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| GAO Chen,LI Feng,ZHOU Wei,YANG Xiao-jie,SHI Qi,LIU Chang-li,JIANG Hui-ying,BI Xin-yu,YANG Jian-guo,HU Jing-qun,HAN Jun,DONG Xiao-ping. Establishment of a sandwich ELISA method for detection of matrix metalloproteinase 9 protein in sera samples and preliminary application for hepatocellular carcinoma patients[J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2007, 30(3): 288-291 | |
| Authors: | GAO Chen LI Feng ZHOU Wei YANG Xiao-jie SHI Qi LIU Chang-li JIANG Hui-ying BI Xin-yu YANG Jian-guo HU Jing-qun HAN Jun DONG Xiao-ping |
| Abstract: | |
| Keywords: | Carcinoma, hepatoceilular Matrix metalloproteinase Enzyme-linked immunosorbont assay |
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