| 实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因方法的建立 |
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| 作者姓名： | 赵威 邱广斌 张继红 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学盛京医院血液病治疗中心血液研究室,辽宁沈阳,110022
2. 中国人民解放军第二零二医院检验科,辽宁沈阳,110003 |
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| 基金项目： | 沈阳市科技局科学技术项目资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα mRNA的方法.方法 制备目的基因PML-RARα的RNA标准品及管家基因β-actin的RNA标准品.然后将目的基因PML-RARα和管家基因β-actin的标准品梯度稀释作为模板进行实时荧光定量PCR反应,制作标准曲线.利用成功构建的两个标准曲线测定APL患者的目的基因PML-RARα与管家基因β-actin的相对值,分析不同状态患者的微小残留病(MRD)水平是否有差别,从而指导临床的治疗.结果 用本研究建立的实时定量RT-PCR方法可检测出10～5 μg NB4细胞cDNA中的PML-RARα融合基因,其重复性的循环域值(Ct值),管间、批间变异系数(CV)分别为2.2%、4.0%.结论 本研究所建立的实时定量RT-PCR方法灵敏度高、重复性好.应用本法检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因表达水平的改变,有助于监测白血病微小残留病,评价疗效及判断预后.
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| 关 键 词： | 急性早幼粒细胞白血病 实时定量逆转录聚合酶链反应 PML-RARα融合基因 微小残留病 |
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