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链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制
引用本文:李彦芹,郑群,王艳,李卫红,朱俊平,平国玲,范东瀛,张力平. 链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(43): 8733-8736
作者姓名:李彦芹  郑群  王艳  李卫红  朱俊平  平国玲  范东瀛  张力平
作者单位:1. 首都医科大学病原生物学系,北京市,100069
2. 首都医科大学细胞生物学系,北京市,100069
基金项目:北京市教委科技发展计划
摘    要:
目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用。方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成。①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠。②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白。③用0,10,20,100mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用。④Bel-7402细胞经10mg/L或50mg/L细菌蛋白分别作用48,72h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布。⑤Bel-7402细胞经50mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率。⑥用50mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响。结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系。②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P<0.05);流式细胞术检测显示,经50mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P<0.01)。③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低。结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平。

关 键 词:链球菌  细胞凋亡  人肝癌Bel-7402细胞  流式细胞术
文章编号:1673-8225(2007)43-08733-04
修稿时间:2007-03-12

Inhibitory effects of streptococcal protein on the proliferation of human hepatocelluar carcinoma Bel-7402 cells:An investigation of the molecular mechanism
Li YQ,Zheng Q,Wang Y,Li WH,Zhu JP,Ping GL,Fan DY,Zhang LP. Inhibitory effects of streptococcal protein on the proliferation of human hepatocelluar carcinoma Bel-7402 cells:An investigation of the molecular mechanism[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(43): 8733-8736
Authors:Li YQ  Zheng Q  Wang Y  Li WH  Zhu JP  Ping GL  Fan DY  Zhang LP
Affiliation:1.Department of Pathogenic Biology, Capital Medical University, Beijing 100069, China; 2Department of Cytobiology, Capital Medical University, Beijing 100069, China
Abstract:
Keywords:
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