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| 流式细胞分选术和Rho123在分离MHCC97肿瘤干细胞中的应用 | |
| 引用本文： | 曹云新,千年松,杨安钢,胡金涛. 流式细胞分选术和Rho123在分离MHCC97肿瘤干细胞中的应用[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(46): 9272-9275 |
| 作者姓名： | 曹云新 千年松 杨安钢 胡金涛 |
| 作者单位： | 1. 解放军第四军医大学,免疫学教研室,陕西省西安市,710032 2. 解放军第四军医大学,肝胆外科,陕西省西安市,710032 |
| 摘 要： | 目的:肝癌组织中可能存在具有表型和功能特殊的肝癌细胞,分离和鉴定这群细胞是否具有干细胞特征对阐明肝癌发病机制、揭示肝癌复发和转移具有重要的意义。寻求分离MHCC97肿瘤干细胞的有效方法,探讨角蛋白(CK-19)在不同肝癌细胞亚群中的表达差异。方法:实验于2006-11/2007-05在解放军第四军医大学免疫实验室和肝胆外科实验室完成。细胞来源:MHCC97肝癌细胞(人高转移肝癌细胞系)由上海复旦大学中山医院肝癌研究所提供。实验方法:MHCC97细胞常规消化,HBSS洗涤,制备成单细胞悬液,细胞密度为1×109L-1。每份取1×106个细胞,参考Rho123对线粒体膜电位测定的0.1mg/L质量浓度,分别做0.1mg/L和0.05mg/L两个质量浓度细胞梯度染色,对照组加入维拉帕米(终浓度50mmol/L),以未加Rho123作为阴性对照。实验评估:采用免疫细胞化学方法观察细胞角蛋白19在0.05mg/LRho123细胞及0.1mg/LRho123两组中的表达和含量。结果:单纯加入Rho123组有一低荧光拖尾,而维拉帕米拮抗组无此区域,即0.05mg/LRho123细胞占总数的2.1%,其余为0.1mg/LRho123组细胞。两组细胞内均有细胞角蛋白19阳性表达,阳性反应为显示位于细胞质的棕黄色颗粒,两组比较有统计学差异(P<0.05)结论:细胞角蛋白19在肝癌细胞亚群中表达有差异,强阳性多数分布在0.05mg/LRho123组中,Rho123结合流式细胞分选术可以有效地分选出癌细胞中的肿瘤干细胞。 |
| 关 键 词： | 流式细胞分选术 罗丹明123 肿瘤干细胞 |
| 文章编号： | 1673-8225（2007）46-09272-04 |
| 修稿时间： | 2007-06-28 |
Flow cytometric sorting and Rho123 cells in the isolation of MHCC97 cancer stem cells |
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| Cao YX,Qian NS,Yang AG,Hu JT. Flow cytometric sorting and Rho123 cells in the isolation of MHCC97 cancer stem cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(46): 9272-9275 | |
| Authors: | Cao YX Qian NS Yang AG Hu JT |
| Abstract: | |
| Keywords: | CK-19 |
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