| 摘 要： | 目的 探讨复方斑蝥通过miR-520d/Beclin1信号轴逆转三阴乳腺癌（Triple-negative breast cancer,TNBC）化疗耐药的机制研究。方法 构建人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,MDA-MB-468细胞的耐药模型MDA-MB-231/Doc,MDA-MB-468/Doc。MTT法检测亲本株和耐药株细胞活性;Western blot检测自噬相关蛋白表达;miRNA芯片检测复方斑蝥处理前后的TNBC耐药细胞;实时定量PCR（RealtimePCR）检验miRNA表达以验证芯片检测结果;荧光素酶实验验证miRNA和BECN1/Beclin1的结合位点。结果 MTT结果显示,复方斑蝥注射液能够显著提高TNBC耐药细胞株化疗敏感性。WB结果表明,复方斑蝥注射液能够浓度依赖性的抑制TNBC耐药细胞的自噬水平;miRNA芯片检测发现复方斑蝥能够显著上调miR-520d 水平,RealtimePCR验证了这一结果。荧光素酶实验表明MiR-520d通过作用于Beclin1/BECN1 3" UTR区域抑制其表达;最后,WB检测证明miR-520d mimics能够明显抑制TNBC耐药细胞株中Beclin1/BECN1的蛋白表达,MTT法结果显示miR-520d mimics与TNBC耐药性细胞对多西他赛的敏感性成正相关。结论 复方斑蝥注射液通过调控miR-520d/BECN1/Beclin1信号轴逆转三阴性乳腺癌化疗耐药。
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