Molekulare Aspekte und diagnostische Wertigkeiten von Pilzallergenen

Zusammenfassung. Die Klonierung, Sequenzierung und Produktion von hochreinen Allergenen bietet die Möglichkeit, perfekt standardisierte Allergenpräparate herzustellen. Die Entwicklung eines neuen Klonierungssystems, das auf filamentösen Phagen basiert, führte zu einer schnellen Isolierung und Charakterisierung von Aspergillus fumigatus-Allergenen. Die auf diesem Weg rekombinant hergestellten Proteine wurden serologisch und klinisch geprüft und ihr routinemä-ßiger Einsatz im ImmunoCAP-System evaluiert. Es gelang eine quantitative Übereinstimmung zwischen Hauttestergebnissen und Serologie nachzuweisen, welche das Potential rekombinanter Allergene in der Diagnostik allergischer Krankheiten aufzeigt. Darüber hinaus trägt die Charakterisierung der Pilzallergene wesentlich zum Verständnis der moiekularen Natur der allergieauslösenden Komponenten bei Zum jetzigen Zeitpunkt können, abgesehen von Proteinen mit unbekannten biologischen Funktionen, die Pilzallergene in zwei Klassen eingeteilt werden: 1. Spezies-spezifische sezcrnierte Allergene und 2. cytoplasmatische, hoch konservierte Proteine. Diese letztgenannten Pilzallergene zeigen auch zu Proteinen aus phylogenetisch weit entfernten Organismen weitreichende Sequenzhomologien. Neben der daraus zu erwartenden IgE-Kreuzreaktivität findet man in einigen Fällen auch eine Kreuzreaktivität mit den homologen humanen Proteinen, was auf Autoimmunreaktionen, bei Pilzalleigien hindeutet. Summary. Cloning, sequencing and production of highly pure recombinant allergens allows to produce perfectly standardised allergen preparations. The development of a new cloning system based on filamentous phage allowed the fast isolation and characterisation of allergens from the fungus Aspergillus fumigatus. The produced recombinant allergens were tested in serological and clinical studies as well as for their performance for routine assessments in the ImmunoCAP-system. Thereby, a perfect correlation between skin test results and serology was found showing the potential of recombinant allergens for the diagnosis of allergic diseases. Moreover, the characterisation of fungal allergens substantially contributes to our understanding of the molecular nature of proteins involved in the elication of allergic reactions. Apart from allergenic proteins with unknown biological function, fungal allergens can be subdivided into two classes: 1. Species-specific, secreted proteins and 2. cytoplasmic, even in phylogenetically distant organisms, well conserved proteins. These fungal allergens show extended sequence similarity, a high level of IgE cross-reactivity and in some cases also cross-reactivity with homologous human proteins indicating autoimmune reactions involved in fungal allergy.