抗人T细胞猪免疫球蛋白药代动力学检测方法的建立、验证及应用

目的 建立抗人T细胞猪免疫球蛋白（porcine anti-human T cell immunoglobulin，p-ATG）药代动力学检测方法并验证，以检测用药后患者血清总p-ATG浓度。方法 采用兔抗猪IgG F(ab')₂包被酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG作为二抗，建立人血清p-ATG含量的双抗体夹心ELISA，并验证该方法的标准曲线拟合范围、平行性、精密度、准确度、专属性。用建立的方法对13例患者的不同用药剂量的临床血样进行检测并分析药代动力学。结果 从0.44 μg/ml起始浓度稀释2¹〜2⁷倍的参考品浓度与吸光度值之间呈现S曲线，决定系数(R²)大于0.99，回收率为89.91%〜112.96%；平行性样品斜率与参考品斜率变异系数（coefficient of variation，CV）绝对值<10%，R²>0.99，R²的CV<5%；板间、板内曲线CV<10%；重复性CV<10%，回收率为94.23%〜101.80%；加标回收率均在99.87%〜104.94%之间；输注p-ATG后患者血清与健康人血清以及输注前患者血清p-ATG浓度间差异有统计学意义（F=1.48，P <0.05）。20、25、30 mg剂量用药患者的血样中，p-ATG半衰期分别为20.6、16.6、16.2 d。结论 建立的p-ATG药代动力学检测方法具有良好的重复性、准确度及专属性，可以用于p-ATG临床用药后血清浓度的检测。

Establishment,validation and application of a pharmacokinetic assay for porcine anti-human T cell immunoglobulin