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先天性巨结肠患儿肠道组织内DPF3、Smarcd3和MEF2的表达
引用本文:李力,金先庆,滕银平,李爽爽,王宁,吴欢. 先天性巨结肠患儿肠道组织内DPF3、Smarcd3和MEF2的表达[J]. 中华小儿外科杂志, 2016, 0(4): 262-266. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2016.04.006
作者姓名:李力  金先庆  滕银平  李爽爽  王宁  吴欢
作者单位:400014 重庆医科大学附属儿童医院胃肠新生儿外科,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿科学重庆市重点实验室,重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81370474),国家临床重点专科建设资助项目(国卫办医函(2013)544),National Natural Science Foundation of China(81370474),National Clinical Key Subject Construction Project([2013]544)
摘    要:
目的 通过对DPF3、Smarcd3及MEF2基因在先天性巨结肠(HD)患儿肠道组织内的检测,验证DPF3、Smarcd3及MEF2基因在肠道组织内的表达情况,并探讨DPF3、Smarcd3及MEF2基因在HD发病过程中的可能作用.方法 随机选取28例重庆医科大学附属儿童医院HD患儿手术标本,并根据手术标本取材的位置分为:痉挛段组和吻合口组.利用RealTime-PCR、免疫蛋白印迹法及免疫组织化学染色法从RNA和蛋白水平对DPF3、Smarcd3及MEF2基因在HD患儿肠道组织内的表达进行检测,验证DPF3、Smarcd3及MEF2在肠道组织内的表达,并分析其参与HD发病过程的可能机制.其中,利用BIO-RAD对mRNA数据半定量分析;Genesnap系统及软件对蛋白数据进行分析;免疫组织化学法及光学显微镜数码摄片进行蛋白染色分析;GraphPad Prism5绘图,SPSS(version 17.0)进行数据统计.结果 DPF3 mRNA在患儿吻合口和痉挛段的表达为1.76±1.30和1.07±0.93;蛋白的表达分别为2.31±0.62和1.95±0.57.Smarcd3 mRNA在患儿吻合口和痉挛段的表达为0.68±0.62和0.38±0.42;蛋白的表达分别为0.85±0.43和0.61±0.34;MEF2 mRNA在患儿吻合口和痉挛段的表达为1.01±0.63和0.68±0.39;蛋白的表达分别为2.29±0.38和1.83±0.76.DPF3、Smarcd3及MEF2 mRNA及蛋白在患儿痉挛段的表达较吻合口均降低(P<0.05),且趋势相一致.DPF3、Smarcd3及MEF2在吻合口神经节细胞处可见阳性的棕色颗粒状染色,而在痉挛段未见明显染色.结论 DPF3、Smarcd3及MEF2可能参与HD的发病过程.

关 键 词:先天性巨结肠  聚合酶链反应  基因表达

Expression levels and potential roles of DPF3 and its related genes of Smarcd3 and MEF2 in colonic tissues from patients with Hirschsprung's disease
Abstract:
Keywords:Congenital megacolon  Polymerase chain reaction  Gene expression
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