SE-HPLC测定刺糖多糖相对分子质量及纯度

目的建立高效液相凝胶色谱法(SE-HPLC)测定刺糖多糖相对分子质量和纯度的方法;分析刺糖多糖的相对分子质量分布及并进行含量测定。方法采用水提醇沉法及AB-8大孔吸附树脂和DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换树脂分离纯化不同相对分子质量的多糖组分,用TSK-GEL G4000PWXL,7.8mm×300mm色谱柱,2414示差折光检测器,测定其相对分子质量分布和纯度。结果得到刺糖多糖组分AP2-4,其多糖相对分子质量为4.9×10~4,纯度含量为(93±3)%;相对分子质量分布:重均分子量(M_r)为4.973 3;数均分子量(M_n)为4.951 8;峰值分子量(M_p)为6.311 2,4.873 2;多分散度(D)为1.0043。结论建立了简便、快捷、精密度高的凝胶色谱柱方法,可较准确地测定刺糖多糖的纯度和相对分子质量分布。