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阻断CD40-CD40L共刺激途径对T细胞表型及细胞因子分泌的作用研究
引用本文:陈纯,黄绍良,段连宁,李浩威,温冠媚,魏菁.阻断CD40-CD40L共刺激途径对T细胞表型及细胞因子分泌的作用研究[J].中国免疫学杂志,2003,19(8):534-537.
作者姓名:陈纯  黄绍良  段连宁  李浩威  温冠媚  魏菁
作者单位:1. 中山大学附属第二医院儿科,广州,510120
2. 中山大学医学院病理生理教研室,广州510120
3. 中山大学附属第二医院医学中心,广州510120
基金项目:美国中华医学会基金资助(CMB)(960360)
摘    要:目的探讨应用抗CD40L单克隆抗体阻断CD40-CD40L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据.方法供鼠(C57BL/6H-2b)脾T细胞作为反应细胞,受鼠(BALB/CH-2d)脾细胞作为刺激细胞,设单抗组(加抗CD40L单抗)和对照组(不加单抗),初次混合淋巴细胞培养(MLR)7天,在不同时间点采用3H-TdR掺入法检测细胞增殖率,以ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10等的水平,第5天采用流式细胞仪检测CD4+T和CD8+T细胞上CD25、CD69、CD40L和CD45RA的表达.再次MLR 5天,第1、3、5天采用3H-TdR掺入法测定细胞的增殖情况和ELISA法测定培养上清液中的上述细胞因子的水平.结果初次和再次MLR结果均显示,单抗组细胞增殖反应率明显低于对照组.初次MLR单抗组中CD4+T和CD8+T细胞比例明显低于对照组(P<0.05);单抗组中CD4+CD25+T、CD4+CD69+T、CD8+CD25+T、 CD4+CD40L+T和CD8+CD69+T细胞比例明显低于对照组(P<0.05),而CD8+CD40L+T和CD4+CD45RA+T细胞的比例与对照组相比无明显差异(P>0.05).初次MLR中单抗组和对照组培养上清中IL-4和IL-10几乎无法测出,而单抗组培养上清中IFN-γ和IL-2的水平均明显低于对照组(P<0.01);再次MLR后培养上清中单抗组IFN-γ、IL-2和IL-4和IL-10的分泌水平明显低于对照组(P<0.05),但处于低水平,仍明显低于对照组.结论在体外MLR体系中,应用抗CD40L单抗孵育供鼠脾T细胞,可同时作用于CD4+T和CD8+T细胞,使CD40L+,CD25+和CD69+表达下降,引起T细胞早期的活化和成熟障碍,T细胞增殖能力减低,抑制了Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2类细胞因子IL-4和IL-10的分泌水平,可诱导供者T细胞免疫耐受.

关 键 词:CD40-CD40L  T细胞表型  细胞因子  分泌作用  免疫耐受
文章编号:1000-484X(2003)08-0534-04

The study of the role of blockade of CD40 ligand-CD40 costimulatory pathway on T lymphocytes typing and cytokines
CHEN Chun,HUANG Shao-Liang,DUAN Lian-Nin et al.The study of the role of blockade of CD40 ligand-CD40 costimulatory pathway on T lymphocytes typing and cytokines[J].Chinese Journal of Immunology,2003,19(8):534-537.
Authors:CHEN Chun  HUANG Shao-Liang  DUAN Lian-Nin
Institution:CHEN Chun,HUANG Shao-Liang,DUAN Lian-Nin et al.Department of Pediatrics,the Second Affiliated Hospital,Sun Yet-Sen University,Guangzhou 510120,China
Abstract:
Keywords:Immune tolerance  CD40  CD40 ligand  Cytokine
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