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山奈酚通过mTORC1信号促进牵张力下小鼠骨髓间充质细胞成骨分化机制研究
引用本文:崔琳娜,蒋校文,黄华庆,陈金勇. 山奈酚通过mTORC1信号促进牵张力下小鼠骨髓间充质细胞成骨分化机制研究[J]. 口腔疾病防治, 2021, 29(4)
作者姓名:崔琳娜  蒋校文  黄华庆  陈金勇
作者单位:郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515;郴州市第一人民医院口腔科 南华大学转化医学研究所,湖南 郴州 423000;南方医科大学口腔医学院,广东 广州 510515
基金项目:国家自然科学基金;湖南省自然科学基金;郴州市第一人民医院重点项目
摘    要:
目的探讨山奈酚(kaempferol,Kae)对周期性单轴牵张力下小鼠骨髓间充质细胞(bone marrow mes?enchymal cells,BMMCs)成骨分化过程中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin com?plex 1,mTORC1)信号通路的作用。方法对体外分离培养的小鼠BMMCs施加形变量10%的单轴动态牵张力,通过细胞毒性试验筛选出合适浓度Kae,并添加工具药pp242改变内源性mTOR信号,在牵张后4 h利用化学比色法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性变化、ELISA法检测骨钙素(osteocalcin,OCN)表达量,流式细胞仪检测细胞内钙离子相对含量;利用Western Blot检测内源性mTORC1信号通路主要分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、核糖体蛋白S6激酶(ribosomal proteinS6 kinases,S6K)、4E/BP1的磷酸化表达及成骨转录因子Runx2和Osterix的表达变化,qRT?PCR检测上述因子mRNA表达水平。结果10μmol/L Kae对细胞的抑制作用较小,且成骨能力最强。加力结束后4 h,Kae能够有效促进BMMCs成骨分化,ALP表达为(153.04±18.72)U/mg,OCN表达为(1.64±0.25)U,成骨转录因子Runx2、Osterix的mRNA水平和蛋白水平表达上调,细胞内钙离子含量下降,同时mTORC1信号通路中mTOR、S6K mRNA水平及蛋白磷酸化表达上调,4E/BP1 mRNA水平及蛋白磷酸化表达下调;在加入pp242抑制mTORC1信号表达后,mTOR、S6K mRNA水平及蛋白磷酸化表达下调,4E/BP1 mRNA水平及蛋白磷酸化表达上调,BMMCs成骨分化效应显著被抑制,Runx2、Osterix的mRNA水平和蛋白表达显著下调,ALP及OCN表达下调,细胞内钙离子含量增高。结论Kae通过mTORC1信号通路促进牵张力下小鼠BMMCs成骨分化。

关 键 词:骨髓间充质细胞  哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1  单轴牵张力  牵张成骨  碱性磷酸酶  骨钙素  Runt相关转录因子  核糖体蛋白S6激酶  山奈酚

Kaempferol promotes osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal cells under tension stress via the mTORC1 signaling pathway
CUI Linna,JIANG Xiaowen,HUANG Huaqing,CHEN Jinyong. Kaempferol promotes osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal cells under tension stress via the mTORC1 signaling pathway[J]. Journal of Prevention and Treatment for Stomatological Diseases, 2021, 29(4)
Authors:CUI Linna  JIANG Xiaowen  HUANG Huaqing  CHEN Jinyong
Affiliation:(Department of Stomatology,The First People′s Hospital of Chenzhou City,Institute of Translation Medicine,University of China South,Chenzhou 423000,China;School of Stomatology of Southern Medical University,Guangzhou 510515,China)
Abstract:
Keywords:
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