熊果酸抑制AngⅡ诱导大鼠心肌细胞肥大实验研究

目的 探讨熊果酸（ursolic acid，UA）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）诱导大鼠心肌细胞肥大的抑制作用及其可能机制。方法 按常规方法分离并培养新生大鼠心肌细胞。CCK-8法确定UA（2、4、8、16μmol/L）对心肌细胞的最佳作用浓度，利用AngⅡ诱导建立新生大鼠心肌细胞肥大模型。实验分对照组（control组）、AngⅡ组、UA干预组、LY294002（PI₃K/Akt通路抑制剂）干预组共4组。UA和LY294002均预处理心肌细胞30min。以心肌细胞表面积、β-肌球蛋白重链（β-MHC）mRNA和脑钠肽（BNP）mRNA表达作为心肌细胞肥大标志，同时使用蛋白免疫印迹法检测T-Akt（total Akt）和p-Akt（phospho-Akt）蛋白表达。结果 显微镜下观察各组心肌细胞生长良好。与control组相比，AngⅡ组和UA干预组大鼠心肌细胞表面积增加（P<0.05），LY294002干预组心肌细胞表面积差异无统计学意义（P>0.05）；与AngⅡ组相比，UA干预组和LY294002干预组大鼠心肌细胞表面积减小（P<0.05）。与control组相比，AngⅡ组的p-Akt蛋白、BNP mRNA和β-MHC mRNA表达显著增加（P<0.05）；与AngⅡ组相比，UA干预组和LY294002干预组的p-Akt蛋白、BNP mRNA和β-MHC mRNA表达均降低（P<0.05）；UA干预组和LY294002干预组之间p-Akt蛋白、BNP mRNA和β-MHC mRNA表达均差异无统计学意义（P>0.05）；4个实验组间T-Akt蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 （1）AngⅡ诱导的新生大鼠心肌细胞肥大模型中，心肌细胞表面积增加，BNP mRNA和β-MHC mRNA表达升高，同时伴有p-Akt蛋白表达增加，提示PI₃K/Akt通路在AngⅡ致心肌细胞肥大中起重要作用。（2）UA能减轻AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大，使心肌细胞表面积减小，p-Akt蛋白、BNP mRNA和β-MHC mRNA表达减少，这与LY294002作用一致，提示UA可能是通过抑制PI₃K/Akt通路而发挥抗心肌肥大作用。