| 钙调素ELISA定量检测方法的建立与实验条件优化 |
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| 作者姓名： | 王娟 李晓军 潘继文 虞伟 廖建辉 赵慧斌 王艾丽 武建国 |
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| 作者单位： | [1]南京军区南京总医院全军医学检验中心，江苏南京210002 [2]安徽合肥市第一人民医院检验科，安徽合肥230061 [3]东南大学国家教委分子与生物分子电子学开放实验室，江苏南京210096 |
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| 摘 要： | 目的 研究ELISA法定量测定钙调素(CaM)的最优条件。方法 用重组人CaM、免抗CaM，通过对聚苯乙烯反应板进行紫外辐照处理，改善抗原因相化条件；通过对抗原包被液、包被时间等条件优化，建立简便、快速、准确的ELISA定量技术。结果 以pH7．4 0．01mol/L的PB为包被液，包被及后续封闭时间为4℃静置72h，CaM包被浓度为5-8g/ml，抗原抗体反应时间为37℃ 60min，可获最佳CaM定量结果。结论 建立的检测CaM的ELISA测定方法，敏感性、重复性均在临床检测可接受的范围内，标准曲线的线性也较好，可用于细胞内外CaM的定量研究。
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| 关 键 词： | 钙调素 ELISA 定量检测 实验条件优化 包被液 抗原包被浓度 灵敏度 真核细胞 Ca^2＋结合蛋白 |
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