| 摘 要： | 背景我国结肠癌发病率与死亡率逐年上升,目前结肠癌的发病机制尚未阐明, LncRNA 在结肠癌等肿瘤发生过程中可发挥重要调控作用,其主要通过竞争性结合miRNA而发挥作用,已知LncRNA LINC01224在肿瘤中可能发挥癌基因作用,但LINC01224在结肠癌形成及发展过程中的作用机制尚未阐明.目的探讨LncRNA LINC01224/miR-513b-5p对结肠癌细胞SW1116增殖、迁移、侵袭的影响及其可能作用机制.方法采用qRT-PCR法检测癌旁组织与结肠癌组织中LINC01224、miR-513b-5p的表达量;si-NC、siLINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、siLINC01224与anti-miR-513b-5p分别转染入人结肠癌细胞SW1116;采用qRT-PCR法检测SW1116细胞中LINC01224、miR-513b-5p的表达量;采用MTT实验检测细胞存活率;应用流式细胞仪检测细胞周期;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验检测LINC01224与miR-513b-5p的靶向关系;Westernblot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量.结果与癌旁组织比较,结肠癌组织中LINC01224的表达水平升高(P0.05),miR-513b-5p的表达水平降低(P0.05);与si-NC组比较,si-LINC01224组细胞存活率降低(P0.05),G0-G1期细胞比例升高(P0.05),S期细胞比例降低(P0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P0.05),N-cadherin蛋白水平降低(P0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC01224可靶向结合miR-513b-5p;与siLINC01224+anti-miR-NC组比较,si-LINC01224+antimiR-513b-5p组细胞存活率升高(P0.05),G0-G1期细胞比例降低(P0.05),S期细胞比例升高(P0.05),迁移及侵袭细胞数增多(P0.05),E-cadherin蛋白水平降低(P0.05),N-cadherin蛋白水平升高(P0.05).结论干扰LINC01224表达可通过上调miR-513b-5p而减弱结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并可诱导细胞周期阻滞于G0-G1期.
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