| 糖尿病病人突变CD59蛋白在真核细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 吴宁,高美华. 糖尿病病人突变CD59蛋白在真核细胞中的表达[J]. 青岛大学医学院学报, 2009, 45(5): 421-423. DOI: 10.3969/j.issn.1672-4488.2009.05.006 |
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| 作者姓名： | 吴宁 高美华 |
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| 作者单位： | 青岛大学医学院附属青岛市市立医院内分泌科,山东,青岛,266071;青岛大学医学院免疫学教研室 |
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| 摘 要： | 目的 构建两种含有人CD59蛋白突变体的真核表达载体,获得中国仓鼠卵巢(CHO)细胞真核表达系统,为在基因水平阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定基础.方法 将两种含有不同突变体的人CD59全长cDNA序列重组pALTER质粒,应用阳离子脂质体导入法与pcDNA共转染CHO细胞,用G418筛选阳性克隆,应用细胞免疫组化及流式细胞仪检测CD59在CHO细胞表面的表达. 结果 含有人CD59两种突变体的重组pLATER质粒经酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定,得到长496 bp的电泳条带,与所插入片段完全相符.运用阳离子脂质体导入法将重组pALTER质粒共转染CHO细胞成功,筛选出的阳性克隆经细胞免疫组化检测,证明突变的CD59可在CHO细胞表面表达,流式细胞仪测定表达率分别为68.6%、71.7%.结论 成功建立了两种高效表达人CD59突变体的真核表达系统,能够进一步研究人CD59的突变体糖基化及抗补体活性,为阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 抗原 CD59 糖尿病 突变 CHO细胞 转染 抗补体活性 |
EXPRESSION OF HUMAN MUTANT CD59 IN CHINESE HAMSTER OVARY CELLS IN PATIENTS WITH DIABETES |
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| WU NING,GAO MEI-HUA. EXPRESSION OF HUMAN MUTANT CD59 IN CHINESE HAMSTER OVARY CELLS IN PATIENTS WITH DIABETES[J]. Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis, 2009, 45(5): 421-423. DOI: 10.3969/j.issn.1672-4488.2009.05.006 |
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| Authors: | WU NING GAO MEI-HUA |
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